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棒狀薄層色譜儀這些小知識,你了解了嗎?

閱讀:2790        發(fā)布時間:2021-5-8

1、怎樣 提 高 點樣準確度

在棒狀薄層色譜儀分析中點樣是造成TLC定量誤差的主要來源。潤揚儀器通過試驗可以認為定量毛細管較適合較小體積的點樣;進樣器適合較大體積的點樣。這主要是因為進樣器受小氣泡、溶液回爬現象的影響較大。為避 免不同定量毛細管間的點樣誤差、建議一整塊的棒狀薄層色譜柱上用同一只定量毛細管。但應注意在換樣品時,應將毛細管用超聲波或不同極性溶劑清洗干凈。在制備樣品時,溶樣溶劑黏度不能過高,以便于點樣;溶劑沸點過低則進樣體積易變,過高則會改變展開劑組成。較好TLC樣點的原點一般底邊距1~5cm。

2、展開劑的選擇

TLC與HPLC相比,一個較好的優(yōu)點就是流動相的選擇具有大的靈活性。流動相的選擇的目的是使絕大部分樣品的RF值位于0.1–0.7之間并達到較好的分離,與此對應的是流動相要有適當的強度和組成。流動相強度越大,溶質RF值越大,但很可能 降 低 分離能力;另外單一溶劑很難分離較復雜的混合物,根據相似相溶原理,要使用多元溶劑體系。一般展開劑體系選擇如下:根據分離樣品性質、薄層色譜柱性質選擇一個二元溶劑體系,通過調節(jié)溶劑比例以尋求適合RF值,適合的RF值找到后,再尋求極性參數相同的二元溶劑體系兩個,以這三個組成為三點組成一個三角形,則可看到:三角形頂點是二元體系,邊是三元體系,三角形內是四元體系,并且極性一致,可根據幾何原理得出任一點組成。這種方法較為直觀,也較簡單。

3、TLC的通用顯色方法

理想的顯色希望靈度高、ban點顏色穩(wěn)定、ban點與背景間的對 比 度好、ban點的大小及顏色的深度與物質的量成正比。在樣品組成并不wan全已知的情況下,通用顯色方法顯得尤qi重要。通用顯色法主要有:

(1)紫外照射法:方便,不破壞樣品;棒狀薄層色譜儀常用方法。

(2)碘蒸氣法:通用 性 強,與紫外法結合靈敏度高于該兩法單獨使用;

(3)熒光試劑:制造熒光背景,使原來紫外下無熒光物質被鑒別,有熒光物質 較 明 顯;

(4)硫酸溶液:對絕大多數有 機 物 有 效,但有破壞性。

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