BL21(DE3)pLysS感受態細胞基因型：

F^- ompT hsdS(r_B^-m_B^-) gal dcm(DE3)pLysS Cam^r

BL21(DE3)pLysS感受態細胞簡要說明：

 BL21(DE3)pLysS 感受態細胞攜帶 pLysS質粒，具有氯霉素抗性。
pLysS含有表達 T7 溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大腸桿菌細胞壁上的肽聚糖溶解大腸桿菌，能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾IPTG誘導的表達，適合表達毒性蛋白和非毒性蛋白。
該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區（DE3區含有T7噬菌體RNA聚合酶）， BL21(DE3)pLysS 感受態細胞由特殊工藝制作經pUC19質粒檢測轉化效率高達10⁸cfu/μg。
 

BL21(DE3)pLysS感受態細胞操作說明：

1.  取100μl冰上融化的 L21(DE3)pLysS感受態細胞，加入目的質粒并輕輕混勻，冰上靜置 25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含34 µg/ml氯霉素及所選質粒篩選抗生素的2YT 或LB培養基上。

1. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

BL21(DE3)pLysS感受態細胞注意事項：

1.   感受態細胞在冰上融化。
2.  混入質粒時應輕柔操作。
3.  轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。
4.  誘導時，IPTG濃度可選（0.1-2mM均可）。
5.  為獲得需要量的蛋白，誘導時間，溫度，IPTG濃度需實驗者優化。

6. BL21(DE3)pLysS 菌株攜帶 pLysS質粒，除復蘇培養基為無抗生素外，其余所用培養基、培養液均應含有34 µg/ml氯霉素，以防質粒丟失。

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