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實驗中免疫組化結果評判的三種方法
閱讀：6403 發布時間：2021-8-11 免疫組織化學(Immunohistochemistry)又稱免疫細胞化學，是根據抗原抗體反應和化學顯色原理，組織切片或細胞標本中的抗原和一抗結合，再利用一抗與標記生物素的二抗進行反應，前者再用標記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素（如鏈霉親和素）結合，最后通過呈色反應在光學顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應物，從而原位確定特定蛋白質的分布和含量。免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及相對定量的研究。想要在做完實驗評判結果，現教您三種方法，簡單易學，方便快捷，一起來看看吧！
（1）陽性著色細胞計數法
在40光鏡下，隨機選擇不重疊的10個視野，人工或機器計數陽性著色細胞，每組3~6張不同動物組織切片，然后進行組間比較即可。
（2）灰密度分析法
通過在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區域、相同條件下用image j進行灰密度分析，然后進行統計分析即可。
（3）評分法
通過在光學顯微鏡下對組織切片分別按染色程度（0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色）、陽性范圍進行評分（1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%），終了時可以分數相加，再進行比較。
對于以上這幾種方法，各有利弊，請細心選擇。要想得到正確結果的前提是您要做出著色均勻、背景很淺的高質量切片。