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PCR檢測試劑盒注意事項分類你知道有哪些
閱讀：1861 發(fā)布時間：2020-10-21PCR檢測試劑盒ELISA的原理：
PCR檢測試劑盒bai是抗原du或抗zhi體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)dao記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
大鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠c-jun ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠膽固醇(CH)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
大鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
PCR檢測試劑盒注意事項:
1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在PCR檢測試劑盒中，進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
(1) 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg／ml等)進(jìn)行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。