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兔核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒注意事項和實驗原理
閱讀：1179 發布時間：2019-1-30兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 注意事項
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值
大于標準品孔孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計
算時請Zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)水平。用純化的兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)，再與HRP 標記的核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)濃度。