① 樣品/標準品不正確稀釋。

② 孵育時間/溫度不正確。

③ 在孵育時為蓋板掩蓋物：在孵育時需蓋上板掩蓋物，以避免液體蒸騰或孵育期間的污染。每個試劑盒內均有足夠數量的酶聯板掩蓋物。

④ 試劑盒檢測波長不正確：要確保分光光度劑的檢測波長是正確的。

⑤ TMB底物的顯色時間過長：請監控顯色時間。說明書中所示的顯色時間或許由于溫度和其它檢測條件的不同而稍有改動。

⑥ 樣品不適合此檢測：在說明書中會列出每種產品的適用標本范圍，超出范圍的標本或許不適于此試劑盒或許檢測條件需求探索。

⑦ 樣品/標準品污染：試劑盒樣品或標準品的污染或許會導致檢測效果“溢值"。

⑧ 偶然試劑不正確稀釋：要嚴格按照說明書來稀釋偶然試劑，濃度過高會構成OD的“溢值"HRP偶然試劑的不正確稀釋

⑨ 所用稀釋液不對：只能運用相應試劑盒內的稀釋液稀釋樣品和標準品。

找到問題原因后，解決問題就簡略的多了。在檢測的時分一定要認真細心，并嚴格按照要求來操作。試驗前，對試劑盒說明書細心的閱讀。

注：以上資料僅供參考！