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動物行為實驗方法硬核總結：懸尾實驗
閱讀：3224 發(fā)布時間：2020-10-21一、實驗原理
懸尾實驗（Tail suspension test, TST）是一種經(jīng)典而又能快速評價抗抑郁藥物、興奮藥物、鎮(zhèn)靜藥物藥效的方法。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無法逃脫，從而放棄掙扎，進入*的抑郁不動狀態(tài)，實驗過程中記錄動物不動時間來反映抑郁狀態(tài)，抗抑郁藥物、興奮藥物能明顯地縮短改變其狀態(tài)。
將實驗動物的尾部進行固定，使其頭部向下懸掛，動物在該環(huán)境中掙扎，企圖擺脫該困境，在經(jīng)過努力仍無法擺脫后，出現(xiàn)間斷性不動，顯示“行為絕望”狀態(tài)。動物在該環(huán)境中拼命掙扎試圖逃跑又無法逃脫，從而提供了一個無可回避的壓迫環(huán)境，一段時間的實驗后，記錄處于該環(huán)境的動物產(chǎn)生絕望的不動狀態(tài)過程中的一系列參數(shù)，動物的表現(xiàn)出的這種典型的“不動狀態(tài)”，反映了一種被稱之為“行為絕望狀態(tài)”，這種行為絕望模型類似，而且對絕大多數(shù)抗抑郁藥物敏感，而且其藥效與臨床藥效顯著相關，所以被廣泛用于抗抑郁藥物的初選。
二、實驗方法及注意事項
正確的懸尾實驗該怎么做？搜索一下網(wǎng)頁，看到實驗者更關注一些細節(jié)問題，如：怎么懸掛？用什么懸掛？空間多少合適？距離底面多少？小鼠攀爬尾巴怎么解決等問題！如何避免老鼠疼痛引起不適？我們今天在這里討論一下！供大家參考：
TST 懸尾實驗不建議用較重的大鼠，因為大鼠只能通過它們的尾巴來支持它們的體重，這對大鼠來說是痛苦的。同樣的道理，應該注意避免使用異常重的小鼠（例如用于模擬肥胖的小鼠），在這種情況下，實驗者應該尋找替代性的測試，例如強迫游泳實驗。
動物從居住環(huán)境帶入實驗環(huán)境應適應一段時間，通常至少一個小時。
實驗環(huán)境應保持安靜，突然大的噪音會使小鼠驚慌失措。
使用軟件分析時，選擇z佳對比度的背景：白鼠使用黑色背景，黑鼠使用白色背景；也可選擇使用由上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的帶背光板的專業(yè)懸尾實驗設備；對老鼠的顏色沒有要求，更可拍攝出高質(zhì)量，高對比度的實驗錄像。
每只小鼠的實驗空間多大？參考空間在 55 高*15 寬*11.5 cm 左右，多通量實驗時，為防止動物彼此觀察或互相影響，中間用隔板隔開；動物懸掛在隔間中間，寬度和深度足夠大，不能與墻壁接觸。
懸掛后動物鼻尖與設備地板之前的距離多少？參考距離在 20~25 cm 左右。
底部建議放置一個可拆卸的拖盤，收集糞便或尿液。
懸掛用的膠帶應牢固地粘貼在小鼠尾部和懸掛桿上，并且足夠堅固以承受正在測試的小鼠的重量。但是，膠帶不應該過于粘滯，因為在實驗結束會從尾部移除。膠帶尺寸應統(tǒng)一，長度 17 厘米，從一端 2 厘米做標記。這個 2 厘米的部分用于將膠帶連接到尾部，而剩余的 15 厘米用于懸掛小鼠；膠帶應貼在尾部的尾端，尾部留 2-3 毫米的距離。
尾巴攀爬阻止器，小鼠在實驗過程，會出現(xiàn)追求和攀爬它們自己的尾巴的現(xiàn)象，這是個普遍的問題。解決方法很簡單，而且非常有效：將一段塑料管切成 4 cm 長中空圓柱體（內(nèi)徑 1.3 cm 左右，1.5 g）放置在小鼠尾巴周圍就能防止這種尾巴爬行行為。注意的是，在沒有使用阻止器之前，已經(jīng)成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此應將這類小鼠排除。
分析時僅有前肢但沒有后肢介入的小動作可判斷為不動；因慣性產(chǎn)生的擺動可判斷為不動；
上海欣軟信息科技有限公司推出的Super系列行為學 Tail Suspension 分析軟件（SuperTst懸尾軟件）可識別動物的多體位輪廓特征，準確區(qū)分并識別出活動和不動行為。
實驗結束后（通常是 6 分鐘），將動物放回鼠籠，應輕輕將膠帶從尾巴上拉下來，不要從尾巴上撕扯膠帶，避免給動物帶來痛苦；
清潔用品，每次實驗完成，收集糞便和尿液，*擦拭懸掛盒。
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