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纖連蛋白(Fibronectin)重組蛋白介紹

2022-9-1  閱讀(916)

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重組人纖維連接蛋白片段(Recombinant human fibronectin fragment,以下簡稱Fibronectin)為一段人工重組蛋白,由574個氨基酸組成,分子量約為63kDa。

纖連蛋白(Fibronectin)包括三個功能區 :

[1] C-Domain:細胞粘附區域,含RGD序列,又稱細胞結合域(central cell-binding domain)

[2] H-Domain:提供病毒粘附,又稱肝***脂結合域(heparin-binding domain)

[3] CS-1位點:提供細胞粘附功能


纖連蛋白(Fibronectin結構如下圖所示

Fibronectin·-1.png


纖連蛋白(Fibronectin應用

1. 提高逆轉錄病毒、慢病毒的轉染效率

作用原理如下:

細胞表面VLA-4及VLA-5可分別與Fibronectin上的CS-1 位點及C-Domain結合,逆轉錄病毒載體可以與H -Domain結合。在經Fibronectin包被的培養容器表面,細胞與病毒載體以高濃度共存,從而顯著提高病毒的轉染效率30~70%。


2. 促進細胞黏連粘附及刺激細胞增殖

細胞的黏連是機體結構得以維持、細胞生長完成的必要條件,研究結果表明:Fibronectin作為細胞培養的基質,可以促進細胞的黏連生長,使多種細胞的貼壁率達到90%以上(對照組為10%),細胞形態結構良好,細胞的代謝率增強,DNA、RNA及蛋白質合成速度提高約5倍,細胞的集落率升高幾倍,原代培養的成活率明顯提高,細胞生長時間縮短。


同時,Fibronectin能刺激細胞上千倍的增殖。作用原理是: Fibronectin和抗CD3抗體可分別與T淋巴細胞上的VLA和TCR結合, 兩者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,通過Ras途徑刺激T細胞的增殖和分化,使其獲得上千倍的增殖。

3. 其它應用

研究還證明,Fibronectin能提高細胞的融合率,縮短融合周期,可應用于許多科研中,如應用于細胞雜交瘤技術等。將Fibronectin涂到微球載體上作為細胞大量生產的介質,可以節省空間,節省原材料,成為應用培養細胞技術來生產新藥品的基礎物質。


賽爾瑞成提供高品質重組人Fibronectin,是在符合GMP標準要求的潔凈間由原核系統表達、經分離純化和過濾除菌等步驟制成 ,分子量約為63.0 kDa。該產品具有高純度,高活性,低內毒素的特點 ,并通過 ISO9001、ISO13485質量體系雙重認證。

重組人Fibronectin產品特點

純化自重組 E.coli 菌株,其中攜帶有編碼人纖維連接蛋白片段的質粒

無血清無動物來源

內毒素水平:<1 EU/μg

純度:經SDS-PAGE電泳檢測純度>95%


Fibronectin-3.png

生物學活性: 在促進小鼠3T3細胞的粘附和增殖實驗中,我公司生產的重組人Fibronectin表現出較好的促增值活性,結果如下圖所示:

Fibronectin-4.png

賽爾瑞成高品質重組細胞因子

GMP條件生產 | ISO9001、ISO13485質量體系雙認證 | 重組表達工藝

高純度>95%,高活性,低內毒素<1EU/μg

賽爾瑞成技術團隊常年從事抗體和重組蛋白的開發工作, 曾承擔國家“863"計劃項目、國家重大新藥創制項目、國家自然科學基金項目、省級科技攻關計劃項目等 ,每年為客戶提供200 多種重組蛋白和重組抗體定制服務。

目前,賽爾瑞成已研發出幾十種高品質重組細胞因子, 產品均具有高純度>95%,高活性,低內毒素<1EU/μg的特點 ,已廣泛應用于細胞培養相關研究和工業化生產領域,并得到了大量客戶的認可。


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