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使用液相色譜-三重四極桿質譜法檢測 化妝品中的秋水仙堿和秋水仙胺
閱讀：325 發布時間：2025-2-25摘要本應用簡報介紹了一種采用液相色譜-三重四極桿質譜聯用系統測定化妝品中禁用物質秋水仙堿和秋水仙胺含量的方法。該方法操作簡便、靈敏度高；在 0.1–200 µg/L 的濃度范圍內表現出良好的線性；在化妝品空白基質中的兩種加標濃度下，目標化合物的回收率在 93%–111% 之間，且六次平行測定結果的相對標準偏差在 1.5%–7.3% 之間，表現出良好的準確度和精密度。該方法適用于化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的檢測。
前言化妝品作為美容和個人護理產品，直接影響消費者的皮膚健康和整體福祉。近年來，隨著消費者對安全、健康的日益關注，越來越多化妝品中開始添加純植物提取的中草藥成分，以實現天然保濕、抗炎等護膚目的。但是，所添加的中草藥成分在產生功效的同時，也有可能引入具有毒性的生物堿類化合物，如秋水仙堿及其鹽類。如果消費者長期使用含有此類生物堿類化合物的化妝品，會損傷肝、腎和骨髓等器官，引起嘔吐、腹瀉、腹痛、胃腸等不良反應[1]。為保障消費者的健康和權益，監管機構嚴禁化妝品中使用秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺。目前，針對化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的檢測方法包括高效液相色譜法 (HPLC)、氣質聯用法 (GC-MS) 等。其中，HPLC 法操作簡單，但選擇性差、靈敏度有限，不適用于痕量檢測；GC-MS 法選擇性高，但需要對樣品進行衍生，操作復雜，重現性差。相比之下，液相色譜-三重四極桿質譜聯用法 (LC-MS/MS) 作為一種高效、靈敏且可靠的分析技術，正逐漸成為化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的檢測方法[2]。本文介紹了一種采用 Agilent 1290 Infinity II 液相色譜/6470 三重四極桿液質聯用系統檢測化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的方法。該方法簡單、靈敏度高且準確可靠，適用于準確測定化妝品中的痕量秋水仙堿和秋水仙胺。
實驗部分試劑和樣品實驗用甲醇、乙腈、正己烷、甲酸均為色譜純，購自美國 Fisher公司；乙酸銨溶液購自德國 Merck 公司；實驗用水為經 Milli-Q 系統凈化的超純水（電阻率 18.2 MΩ）；秋水仙堿和秋水仙胺標準品購自天津阿爾塔科技公司；實驗用化妝品樣品購自北京市場。儀器和設備采用 Agilent 1290 Infinity II 液相色譜/6470 三重四極桿液質聯用系統；以及渦旋混勻器（德國 IKA 公司）、KQ-500B 型超聲儀（昆山市超聲器有限公司）、TD5A-WS 離心機（湖南湘儀離心機儀器有限公司）和 Milli-Q 超純水裝置（德國 Merck 公司）
樣品前處理稱取 1.0 g 樣品，準確加入 10 mL 用正己烷飽和的甲醇乙腈 (1/1)溶液，渦旋混勻后，超聲提取 15 min；然后以 9500 r/min 離心5 min，取上清液 5 mL 于 10 mL 容量瓶中，用水定容至刻度，混勻；取 5 mL 加入 15 mL 離心管中，加入 5 mL 正己烷，渦旋混合；然后以 9500 r/min 離心 5 min，棄去上層，并將下層清液用過濾膜過濾后待測[3]。
液相色譜條件色譜柱： Agilent Eclipse Plus C18, 2.1 × 100 mm,1.8 µm（部件號 959758-902）柱溫： 40 °C進樣量： 2 µL流動相： A) 含 0.1% 甲酸和 5 mmol/L 乙酸銨的水溶液；B) 甲醇流速： 0.3 mL/min梯度程序： 時間 (min) B (%) 0 10 5 100 7 100后運行時間：3 min
質譜條件離子模式： ESI，正離子模式干燥氣溫度： 300 °C干燥氣流速： 8 L/min鞘氣溫度： 350 °C鞘氣流速： 11 L/min霧化器壓力： 25 psi毛細管電壓： 3000 V噴嘴電壓： 500 V多反應監測 (MRM) 采集參數：見表 1
質譜與色譜條件的優化秋水仙堿和秋水仙素屬于生物堿類化合物，在電噴霧離子源正離子模式下容易產生 [M+H]+ 準分子離子峰。采用濃度為 1 mg/L 的標準溶液，對質譜離子源和多反應監測 (MRM) 離子對條件進行優化。優化后的 MRM 參數如表 1 所列。確定質譜條件后，選取色譜柱 Eclipse Plus C18 和 PoroshellEC-C18，考察以水/甲醇和水/乙腈作為流動相、以甲酸和乙酸銨作為添加劑時的分離效果。綜合考慮分離度、峰形和分析效率等因素，最終選取 Eclipse Plus C18 色譜柱和含 0.1% 甲酸和5 mmol/L 乙酸銨的水溶液/甲醇流動相體系。經梯度優化后，所得秋水仙堿和秋水仙胺標樣 (10.0 µg/L) 的 MRM 提取色譜圖如圖 1 所示。從圖中可以看出，秋水仙堿和秋水仙胺得到有效分離，峰形良好，且不受基質明顯干擾。
線性范圍采用外標法進行定量，在 0.005–200 µg/L 的濃度范圍內考察方法線性。結果如表 2 所示。從表中可以看出，秋水仙堿和秋水仙胺分別在 0.01–100 µg/L 和 0.01–200 µg/L 的濃度范圍內獲得了良好的線性響應，線性相關系數 (R2) 高于 0.997，表明該方法具有較寬的線性范圍。
方法準確度和精密度取空白乳液化妝品和膏狀化妝品，分別以 2 µg/kg 和 20 µg/kg的濃度添加秋水仙堿和秋水仙胺，并且在每個加標水平下重復測定 6 次，對方法準確度和精密度進行評估。結果如表 3 所列。從表中可以看出，在低加標濃度下，目標化合物的回收率在93.2%–110.7% 之間，相對標準偏差在 4.3%–7.3% 之間；在高加標濃度下，目標化合物的回收率在 93.5%–102.1% 之間，相對標準偏差在 1.5%–3.2% 之間，表明該方法具有良好的準確度和精密度
實際樣品分析使用所開發的方法對購自北京市場的 6 種不同品牌的化妝品（包括祛痘消炎膏霜類 3 個、清潔護膚乳液類 3 個）進行分析，在所有樣品中均未檢出秋水仙堿和秋水仙胺。
結論本文介紹了一種采用液相色譜-三重四極桿質譜聯用法測定化妝品中秋水仙堿和秋水仙胺的方法。該方法操作簡便、靈敏度高、線性范圍寬，且具有優異的準確度和精密度，適用于測定不同類型化妝品中的痕量秋水仙堿和秋水仙胺。