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液相色譜儀對a立哌唑的生產進行過程控制
閱讀：465 發布時間：2023-4-10Agilent 1120 一體式液相色譜儀是常規分析型液相色譜選擇的系統。它是一款簡單易用、高性能、高可靠性的一體式液相色譜儀。由于保留時間和峰面積的精密度高，其非常適用于藥物生產的過程控制。本應用報告表明：• 良好的保留時間精密度，相對標準偏差為(RSD) < 0.07 %。• 良好的峰面積精密度，基線分離峰的RSD < 0.25 %。
前言在活性藥物成分(APIs)的成產過程中，必須對前體或化學合成過程中所形成副產物的水平進行監測。為了保證符合標準，生產者需要進行若干分析，稱為過程分析。HPLC 是常采用的技術，主要是因為它可以將待測物彼此分離，還能進行定性和定量分析。建立的色譜方法必須在數年之內可靠耐用。本研究的目的是建立阿li哌唑及其前體的HPLC 分析方法，該方法應具有所需要的特異性和靈敏度。本應用報告報導了用反相高效液相色譜法（RPHPLC）對阿li哌唑進行過程控制的優點。重點是可以在整個合
實驗儀器Agilent 1120一體式液相色譜系統包括以下組件：• 低壓混合梯度泵• 含樣品盤的自動進樣器• 柱溫箱，最長可容納250 mm的色譜柱• 可變波長檢測器 (VWD)
色譜柱采用Agilent TC（普通碳覆蓋率）C18(2) 柱，150 x 4.6 mm，5 µm粒度。儀器由安捷倫EZChromElite Compact Compliance軟件控制
本研究所用的是抗精神病藥物阿li哌唑及其兩個起始原料。1-(2,3) 六氫吡嗪鹽酸鹽（起始原料-1）和 7-(4-溴丁氧基)-3,4-二氫喹諾酮（起始原料-2）是合成阿li哌唑的兩個原料。合成路線如圖2所示。
樣品為了模擬過程控制藥物，我們制備了含各種濃度起始原料1、2和產物阿li哌唑的樣品。在反應過程中，起始原料的濃度逐漸減小，而產物的濃度不斷增加。
色譜參數實驗的目的是建立分析阿li哌唑及其相關化合物的最佳色譜條件。根據這些實驗，選擇了以下條件：• 樣品：1-(2,3-二lv苯基) 六氫吡嗪鹽酸鹽、7-(4-溴丁氧基)-3,4-二氫喹諾酮和阿li哌唑• 色譜柱：Agilent TC-C18,150 x 4.6 mm, 5 µm• 流動相：A = 水 + 0.2 % 三氟醋酸(TFA),B = 乙腈 + 0.16 % TFA (TFA 用于增加保留和改善峰形)• 流速：1.0 mL/min• 梯度：0 分鐘30 %B，7分鐘 70%B，并保持該比例2分鐘以上• 進樣體積：5 µL• 帶清洗瓶（乙腈）的自動進樣器編程，清洗針頭外部• 分析時間：9分鐘• 運行后時間：5分鐘• VWD: 254 nm, 峰寬(PW)> 0.05 分鐘
序列表表1顯示了建立的序列表。從2號到 9 號樣品瓶，含各不同濃度的 3種化合物，每個樣品進樣3次，以計算RSD。
結果與討論所建立的色譜方法能使所有化合物基線分離。圖 3 顯示了起始原料1 和 2 以及產物阿li哌唑的分離。分離時間為 9 分鐘，總分析時間（包括平衡）可在14分鐘以內，包括再平衡時間。
圖 4 顯示了反應監測分析的重疊圖譜。圖5是本系列最后的過程控制樣品三次進樣，以及空白分析的重疊圖譜。過程控制樣品含阿li哌唑和占主化合物0.025%的起始原料1。圖中還顯示了起始物質區域的放大圖譜。方法的精密度（RSD）用重復測定的標準偏差百分平均值表示。日內精密度由對8個濃度水平標準混合物連續測定3次獲得。每個過程檢查樣品三次連續進樣的保留時間和峰面積見表 2。峰面積的RSD小于0.25%。
結論本文建立了同時測定阿li哌唑及前體產物的 HPLC 方法。而且，還證明了該色譜方法可用于阿li哌唑合成的過程控制。Agilent1120一體式液相色譜系統是過程控制的良好選擇，因為它可以提供高度重復的結果，即高精密度的保留時間和峰面積。在我們的應用實例中，保留時間的精密度<0.06% RSD，基線分離峰的面積精密度< 0.23% RSD。
