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液相色譜系統(tǒng)篩查精細(xì)化學(xué)品中的雜質(zhì)
閱讀：572 發(fā)布時(shí)間：2023-2-20前言為了確保產(chǎn)品質(zhì)量、性能以及消費(fèi)者安全，分析原料、中間體以及最終用途廣泛的成品中的雜質(zhì)分析至關(guān)重要。使用高效液相色譜（HPLC）成功進(jìn)行雜質(zhì)分析的基本條件包括整個(gè)分離過(guò)程中的梯度洗脫和多波長(zhǎng)監(jiān)測(cè)，并可從其他檢測(cè)器中獲益，如蒸發(fā)光散射儀（ELSD）和質(zhì)譜儀（MS）。由于雜質(zhì)測(cè)定是首要目標(biāo)，我們需要確保流動(dòng)相、樣品瓶及 HPLC 組件中無(wú)雜質(zhì)，雜質(zhì)的存在可能造成分析結(jié)果混亂。稀釋空白和可能由于額外樣品制備，如過(guò)濾而存在污染源的空白應(yīng)小心制備。分析順序可能包括生產(chǎn)原料、溶劑或稀釋空白的運(yùn)行。通過(guò)稀釋主要成分到雜質(zhì)檢測(cè)必需的水平而制定的限值標(biāo)準(zhǔn)也包括在內(nèi)。最后，多數(shù)情況下，還必須包括高純度參考標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)氨基苯甲酸（PABA）歷來(lái)用于防曬防曬劑配方中的抗紫外線成分。由于 PABA 的使用可增加致皮膚癌的風(fēng)險(xiǎn)，目前常用以辛基二甲基對(duì)氨基苯甲酸（OD-PABA）形式的衍生物。不過(guò)，OD-PABA 的降解可能形成 PABA，因此監(jiān)測(cè) PABA 在 OD-PABA中的潛在存在非常重要。作為商業(yè)產(chǎn)品，考慮到安全性和經(jīng)濟(jì)性，OD-PABA 的純度對(duì)于制造商來(lái)說(shuō)十分重要。在本項(xiàng)工作中，我們研究 Agilent 1290 Infinity 液相色譜系統(tǒng)（1200 bar 壓力限值的 UHPLC 系統(tǒng)）紫外/可見(jiàn)二極管陣列檢測(cè)器用于檢測(cè)OD-PABA 樣品雜質(zhì)的能力。
實(shí)驗(yàn)樣品制備OD-PABA 的異丙醇溶液的初始濃度為 1mg/mL，隨后根據(jù)需要稀釋到較低濃度。LC/DAD 系統(tǒng)的進(jìn)樣量為 0.2-2 µL。
LC 方法詳細(xì)內(nèi)容液相色譜條件Agilent 1290 Infinity 液相色譜系統(tǒng)二元泵 G4220A,Agilent 1290 Infinity 液相色譜系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)樣器 G4226A配切換閥的安捷倫柱溫箱 G1316C配有 10 mm 通徑光纖流通池的 Agilent 1290 Infinity 液相色譜系統(tǒng)二極管陣列紫外/可見(jiàn)檢測(cè)器 G4212A色譜柱: （具體使用見(jiàn)各自的色譜圖）Agilent ZORBAX SB-C18 RRHT, 3 mm × 50 mm, 1.8 µm600 bar 部件號(hào) 827975-302Agilent ZORBAX SB-C18 RRHD, 2.1 mm × 100 mm, 1.8 µm1200 bar, 部件號(hào) 858700-902Agilent ZORBAX SB-C18 RRHD, 2.1 mm × 150 mm, 1.8 µm1200 bar, 部件號(hào) 859700-902柱溫: 40 °C流動(dòng)相: A = HPLC 級(jí)水B =乙腈（ACN）或甲醇（MEOH）（具體流動(dòng)相見(jiàn)各自的色譜圖）流速： 具體流速見(jiàn)各自的色譜圖梯度： 梯度條件為 40 %至 90%的乙腈或 50%至 100%的甲醇。梯度斜率一直維持在每柱容增加 3.5%的有機(jī)相，相應(yīng)地改變梯度時(shí)間和流速。這是使用安捷倫方法轉(zhuǎn)化器計(jì)算而確定的[1]。UV 條件監(jiān)測(cè) 210，254，280 和 320 nm，帶寬 4 nm，參考波長(zhǎng)關(guān)閉
結(jié)果和討論OD-PABA 的 UV 響應(yīng)，監(jiān)測(cè)到 4 個(gè)波長(zhǎng)，保留時(shí)間為 2 min。分離過(guò)程的多波長(zhǎng)監(jiān)測(cè)提供了一種簡(jiǎn)單的方法來(lái)捕獲多種雜質(zhì)，并協(xié)助最終波長(zhǎng)條件的選擇以達(dá)到所有分析物檢測(cè)靈敏度大化。