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技術文章

LC/MS/MS 測定牛骨骼肌中的氨苯砜

閱讀:526          發布時間:2022-3-10

前言:本文使用針對獸藥的 Agilent Bond Elut QuEChERS 試劑盒,采用 QuEChERS 方法對牛骨骼肌進行前處理,然后采用 Agilent Poroshell 120 液相色譜柱進行高效分離,并采用Agilent 6460 三重四極桿液質聯用系統對樣品中亞 ppb 級濃度水平的氨苯砜進行高靈敏度檢測。材料與方法樣品前處理針對獸藥的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取鹽包(部件號 G7750-10001)針對獸藥的 Agilent Bond Elut QuEChERS 分散固相萃取,15 mL 萃取管(部件號 5982-4980)HPLC 條件色譜柱: Agilent Poroshell 120 SB-C18, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm(部件號 685775-902)洗脫液: A)0.1 % 甲酸水溶液;B)乙腈進樣量: 10 µL流速: 0.3 mL/min梯度: %B,在 8 分鐘內線性升至 80% B溫度: 室溫樣品瓶: 安捷倫認證樣品瓶(部件號 5183-2072)系統: Agilent 1260 Infinity 液相色譜儀


質譜條件電離模式: ESI + 安捷倫噴射離子流聚焦氣體溫度: 325 °C氣體流速: 10 L/min霧化器壓力: 50 psi鞘氣溫度: 400 °C鞘氣流速: 12 L/min毛細管電壓: 4500 V (ESI+)噴嘴電壓: 0 V (ESI+)系統: Agilent 6460 三重四極桿液質聯用系統


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樣品前處理樣品粉粹將牛骨骼肌切成小塊,置于潔凈的塑料袋中,并在 –20 °C 下冷凍過夜。第二天只取需用量的冷凍骨骼肌,并充分混勻。將樣品*粉碎,制得均質樣品。確保所得的最終樣品中無明顯可見的肉塊。萃取/分離取 5 g (± 0.1 g) 均質樣品于 50 mL 離心管中。采用 20 µL QC 加標溶液制備 QC 樣品。向除了對照空白外的其他所有樣品中加入內標加標溶液 (100 µL)。蓋上離心管,渦旋振蕩 1 min。用分液器向每個離心管中加入 10 mL 水。蓋上離心管,渦旋振蕩 1 min。然后用分液器向每個離心管中加入 15 mL 乙腈。向每個離心管中直接加入針對獸藥的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取鹽包。蓋緊離心管,手動劇烈振搖 20 s,確保溶劑與所有樣品充分混合,結晶聚集物*打碎。將樣品離心管以 4000 rpm 的轉速離心 5 min。


分散固相萃取的凈化從離心管中吸取 8 mL 乙腈上清液,移至 15 mL Agilent Bond ElutQuEChERS 獸藥分散 SPE 管。將離心管蓋緊,渦旋振蕩 1 min。然后用標準離心機將離心管以 4000 rpm 的轉速離心 5 min。取5 mL萃取液,轉移至試管中,并在低于 40 °C 的溫度下于氮氣環境中干燥。最終殘留物用乙腈:水 (1:9) 溶解并定容至 1 mL。然后將殘留物通過 0.2 µm 濾膜(部件號 5190-5106)過濾并用 LC/MS/MS分析。

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結論使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 分析牛骨骼肌中的氨苯砜獲得了良好的回收率和重現性。Bond Elut QuEChERS 聯用LC/MS/MS 分析,可實現肉類樣品中亞 ppb 濃度氨苯砜的高靈敏度定量分析。

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