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前言：在藥物開發過程中，需要通過一系列體外 和體內 方法篩查有待進一步開發的潛在候選藥 物。由于基質組分（血漿、尿液等）的存在，代謝物的體內鑒定和定量分析面對著嚴峻的挑 戰，需要采用靈敏、穩定的分析技術以便實現候選藥物的高通量篩查。常用的分析方法是 采用多反應監測 (MRM) 模式下的三重四極桿質譜儀。然而，這類系統的分析性能將會隨不 揮發性樣品基質組分在離子源和離子遷移光學系統中的積聚而逐漸下降。因此，為維持最佳 性能可能需要頻繁清洗。

Agilent 6470 三重四極桿質譜 (MS) 系統采用多項關鍵的創新性設 計，能夠在較寬的線性動態范圍內對復雜樣品基質中的目標分析物進行靈敏、精密而穩定的 定量分析。這些創新性設計包括： • 經過優化的離子光學元件和前級過濾器幾何尺寸，可在增加離子傳輸的同時大程 度減少污染 • 彎曲的圓錐形六極桿碰撞池，能夠實現高效的 MS/MS 碎裂與離子傳輸 • 具有高能量轉換打拿極和低噪音特性的離子檢測器，能夠在較寬的 m/z 范圍內實現 更有效的正離子與負離子檢測 本應用簡報證明了使用 Agilent 6470 三重四極桿質譜儀結合 Agilent RapidFire 365 高通量 MS (HTMS) 系統在血漿中藥物的快速和穩定分析中所具備的優勢。

Agilent 6470 三重四極桿質譜系統 的穩定性評估 實驗采用分別加入 5 ng/mL 阿pu唑侖、氯 dan平及其相應內標 (IS)（分別為阿pu唑 侖-D5 和氯dan平-D4）混合物的沉淀豬血漿， 來評估 6470 三重四極桿質譜儀與 RapidFire 365 HTMS 聯用系統的分析穩定性。采用體 積比為 1:3 的乙腈對豬血漿進行沉淀，隨后 在 13500 rpm 下離心 5 分鐘。在加入分析 物及內標之前用水稀釋上清液 (1:10)。將加 標血漿樣品轉移至 96 孔微量滴定板中，并 在進行 RapidFire/MS 分析之前使用安捷倫 PlateLoc 微孔板熱封膜機將其密封。 將 RapidFire 365 HTMS 參數優化后得出下 列 RapidFire 方法條件： 清洗溶劑 1（緩沖液 A，流速 1.50 mL/min） 水 + 2 mM 醋酸銨 + 0.1% 甲酸 清洗溶劑 2（緩沖液 B，流速 1.25 mL/min） 20% 乙腈（水溶液）+ 10 mM 醋酸銨 + 0.1% 甲酸 采用流速為 1.25 mL/min 的洗脫溶劑（緩 沖液 C，75% 乙酸乙酯的甲醇溶液）將分析 物從安捷倫 A 型 (C4) 小柱上洗脫下來。在 連續五天內以大約 15 秒/樣品的速度分析血 漿中的小分子藥物（2000 次進樣/天）。本 研究中使用的經過優化的 6470 三重

圖 2 顯示了 10000 次進樣開始和結束時阿pu唑侖 (A) 和氯dan平 (B) 的疊加 MRM 色譜 圖。圖 2 表明經過 10000 次進樣后，阿pu唑侖和氯dan平的峰形和峰面積（峰高）仍保 持不變。 結論 Agilent 6470 三重四極桿質譜儀采用創新性 離子遷移光學系統設計，能夠大程度減少 樣品積聚的不良影響，為沉淀血漿樣品中目 標候選藥物的超高通量分析提供了穩定的分 析平臺。