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技術(shù)文章

使高效液相色譜-熒光檢測法對牛奶中阿維菌素類藥物進行多殘留測定

閱讀:769          發(fā)布時間:2021-12-28

前言:獸藥在治療或防止動物疾病、促進動物生長、提高飼料效果等方面起著十分重要的作用, 被廣泛地用于畜牧業(yè)中。然而,由于養(yǎng)殖人員對科學(xué)知識的缺乏以及一味地追求經(jīng)濟利 益,致使濫用獸藥現(xiàn)象在當(dāng)前畜牧業(yè)中普遍存在。濫用獸藥極易造成肉、蛋、奶等動 物源食品中有害物質(zhì)的殘留,這些藥物殘留給人的健康帶來潛在的危害,包括過敏反應(yīng), 直接中毒效應(yīng),以及對抗生素產(chǎn)生抗藥性等。 阿維菌素 (Avermectin)、伊維菌素 (Ivermectin)、埃普利諾菌素 (Eprinomectin) 和多拉 菌素 (Doramectin) 是一類具有殺蟲、殺螨、殺線蟲活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物,是 一類被廣泛使用的農(nóng)用或獸用殺蟲、殺螨劑。本文所述方法參照食品安全國家標(biāo)準 GB 29696-2013,建立了牛奶中這四種阿維菌素類藥物多殘留分析的高效液相色譜法。 樣品前處理過程 稱取試料 (5+0.05) g 于 50 mL 離心管中,加乙腈 8 mL,渦旋混合 1 min,超聲 1min, 4500 r/ min 離心 10 min,取上清液于另一 50 mL 離心管中。殘渣中加乙腈 8 mL,重復(fù)提 取一次,合并兩次上清液,加水 20 mL、三乙胺 50 µL,混勻,待固相萃取凈化,固相萃 取操作流程見下圖 1。

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本文所述固相萃取結(jié)合高效液相色譜-熒光檢測法可實現(xiàn)對奶產(chǎn)品 中阿維菌素、伊維菌素、埃普利諾菌素和多拉菌素的基線分離和 檢測,方法檢出限為 1 µg/kg,定量限為 2 µg/kg。對比阿維菌 素類藥物標(biāo)準樣品與牛奶空白基質(zhì)的色譜疊加圖(圖 2)可以看 出,在空白基質(zhì)色譜圖中阿維菌素類藥物的出峰位置處無雜峰干 擾,表明本文所用 Agilent Bond Elut C18 固相萃取小柱的凈化效 果優(yōu)異,可有效去除大部分干擾雜質(zhì)。


如圖 3 所示,在線性范圍 5 - 1000 ng/mL 內(nèi)埃普利諾菌素、阿 維菌素、多拉菌素和伊維菌素的線性相關(guān)性良好。在添加水平 2 - 40 µg/kg 下,牛奶中各阿維菌素類藥物的加標(biāo)回收率為 90.43% - 102.79%,RSD ≤ 8% (n=3),如表 2 所示。牛奶中各阿維菌素類 藥物添加水平 10 µg/kg 時,連續(xù)進樣 6 次,所得色譜疊加圖如 圖 4 所示。其中埃普利諾菌素、阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素 的峰面積 RSD 值分別為 0.20%、0.17%、0.29% 和 0.82%,結(jié)果 表現(xiàn)出*的重復(fù)性。

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綜上所述,本文所述方法利用 Agilent Bond Elut C18 固相萃取小 柱對樣品進行凈化,并利用安捷倫的 Poroshell 120 EC-C18 快速柱對目標(biāo)物進行快速分析,方法檢出限、定量限、準確度和 精密度均滿足 GB 29696-2013 的分析要求。

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