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文獻解讀|Revvity LabChip微流控毛細管電泳檢測mRNA純度及完整性的應用

2024-4-10  閱讀(185)

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背景信息

近年來,基于核酸的技術包括mRNA和質粒DNA被廣泛地用于遺傳疾病的治療、癌癥預防,以及疫苗等研究中。與傳統的滅活或減毒活疫苗相比,mRNA疫苗的生產速度相對更快、成本效益更高,而更快的疫苗開發需要一種高效和快速的檢測方法來監測mRNA的純度和完整性。默沙東公司利用LabCh



ip微流控毛細管電泳來檢測mRNA純度及完整性。

LabChip GXII 系統是Revvity公司(原Perkin Elmer)的,該自動化系統使用“芯片上的實驗室"技術進行電泳。在LabChip上,將含有藍色熒光染料的凝膠篩分基質應用于分離通道,然后對樣品進行電動注射,使mRNA與熒光染料結合。施加電壓,mRNA通過凝膠基質遷移,按大小進行分離,通過熒光檢測觀察mRNA信號。每個樣本的分離時間為70秒,覆蓋50-6000 nt的RNA大小,數據可以在Waters Empower 3軟件進行分析。



結果展示

作者在分析開發中主要對樣品制備進行了優化,樣品處理是通過加入高濃度甲酰胺(>80% v/v),在70°C加熱10 min,以確保mRNA變性。LabChip GXII儀器和試劑盒由Revvity公司提供,并評估標準分析參數,包括特異性、線性度、準確性、精密度、LOD和LOQ。該技術成功用于監測不同溫度下LNPs中mRNA的穩定性,目前已用于工藝方法開發。




表1 mRNA完整性分析



總結

本文基于芯片的微流控毛細管電泳系統LabChip,用于評估mRNA疫苗樣本中mRNA的純度和完整性。芯片可重復利用;每個樣品的運行是70s,時間較短,運行96孔板大約2.5小時;并能夠進行高通量的樣品分析。


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