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內(nèi)毒素檢測(cè)(凝膠法)的原理及詳細(xì)步驟!

2023-11-13  閱讀(684)

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一,內(nèi)毒素檢測(cè)(凝膠法)的原理

酶原 內(nèi)毒素 凝固酶

凝固原 凝固酶 凝固素

革蘭氏陰性細(xì)菌內(nèi)毒素催化了LAL中酶原的活化。初始活化速率由內(nèi)毒素的濃度決定?;罨蟮拿福堂福┧饬艘泊嬖谟贚AL中的凝血蛋白(凝固原)內(nèi)的特定化合鍵。水解后,產(chǎn)生的凝固素自行聯(lián)合,并形成凝膠狀膠塊。

凝膠法是一種用于革蘭氏陰性細(xì)菌內(nèi)毒素的測(cè)試。凝膠法在37℃的水浴或干燥熱塊中放置的試管中操作。孵育一小時(shí)后,將試管翻轉(zhuǎn)180°。凝塊牢固地附著在試管底部,表明是陽性反應(yīng)。如果液體從試管側(cè)面向下流動(dòng),則結(jié)果是內(nèi)毒素陰性。



二,檢測(cè)所需主要設(shè)備及材料

試劑

– 鱟試劑(LAL)(PYROGENT™ 試劑)

– 內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(CSE)

– LAL 試劑檢查用水(LRW)(# W50-640, W50-100, W50-500)

器具

– 玻璃稀釋管,13 × 100 mm(# N207)

– 玻璃反應(yīng)管,10 × 75 mm(# N201, N205)

– 獨(dú)立包裝的血清吸管(選購)

– 標(biāo)簽

請(qǐng)使用經(jīng)內(nèi)毒素試驗(yàn)驗(yàn)證合格的無熱原器具。

設(shè)備

– 加熱塊或非循環(huán)熱水浴

– 移液器

– 計(jì)時(shí)器

– 漩渦混合器

– 試管架

三,操作步驟

本指南分步描述了如何進(jìn)行傳統(tǒng)凝膠法 鱟試劑(以下簡(jiǎn)稱LAL)試驗(yàn)。試驗(yàn)開始前,先使試劑瓶溫度與室溫相同。



四,注意事項(xiàng)

– 使用配套的LAL和CSE 試劑

– 建議勿使用塑膠管稀釋內(nèi)毒素

– 遵循所有關(guān)于內(nèi)毒素漩渦震蕩次數(shù)的建議

– 使用經(jīng)內(nèi)毒素試驗(yàn)驗(yàn)證合格的無熱原器具

– 使用前,先使試劑溫度與室溫保持相同

– 不要對(duì)LAL進(jìn)行漩渦震蕩

– 不要污染樣品、標(biāo)準(zhǔn)品、LRW 和器具

– 應(yīng)正確安裝、驗(yàn)證并維護(hù)設(shè)備儀器,避免影響凝膠形成

五,瑋馳相關(guān)產(chǎn)品


凝膠法LAL試劑盒



品牌貨號(hào)名稱規(guī)格靈敏度(EU/ml)
LonzaN283-06PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內(nèi)毒素)64次測(cè)試0.06
LonzaN283-125PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內(nèi)毒素)64次測(cè)試0.125
LonzaN294-03PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內(nèi)毒素)200次測(cè)試0.03
LonzaN294-06PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內(nèi)毒素)200次測(cè)試0.06
LonzaN294-125PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內(nèi)毒素)200次測(cè)試0.125
LAL試劑檢查用水


品牌貨號(hào)名稱規(guī)格
LonzaW50-640LAL試劑檢查用水<0.005 EU/mL,30 ml/瓶
LonzaW50-100LAL試劑檢查用水<0.005 EU/mL,100 ml/瓶
LonzaW50-500LAL試劑檢查用水<0.005 EU/mL,500 ml/瓶
LonzaW50-1000LAL試劑檢查用水<0.005 EU/mL,1000 ml/瓶


無熱原試管


品牌貨號(hào)名稱規(guī)格
LonzaN207無熱原試管30/鋁箔包
LonzaN201無熱原試管50/箱
LonzaN205無熱原試管50/鋁箔包
吸頭


品牌貨號(hào)名稱規(guī)格
LonzaBE25-415Eppendorf® 2-200μl Biopur™ 移液管吸頭<0.001 EU/mL,5個(gè)托盤/pkg;96個(gè)吸頭/托盤
LonzaBE25-417Eppendorf® 50-1000μl Biopur™ 移液管吸頭<0.001 EU/mL,5個(gè)托盤/pkg;96個(gè)吸頭/托盤


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