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隨著分子生物學(xué)和基因工程領(lǐng)域的不斷發(fā)展，細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)的需求也越來越迫切。在當(dāng)前的研究中，常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法包括化學(xué)轉(zhuǎn)染法、電穿孔法、病毒載體轉(zhuǎn)染法等。然而，這些傳統(tǒng)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法存在許多局限性，如低效率、不穩(wěn)定性、細(xì)胞毒性等問題。為了克服這些限制，現(xiàn)已出現(xiàn)了一種新型細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)——4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。
4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)是由Lonza公司開發(fā)的一種基于脈沖電場(chǎng)技術(shù)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，其主要特點(diǎn)是可實(shí)現(xiàn)對(duì)不同類型細(xì)胞的高效、精準(zhǔn)轉(zhuǎn)染，并且無(wú)需使用病毒載體或熒光標(biāo)記物。該系統(tǒng)通過電場(chǎng)脈沖引導(dǎo)外源DNA或RNA進(jìn)入目標(biāo)細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染。與傳統(tǒng)的電穿孔法相比，4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)具有更高的細(xì)胞存活率、更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性，因此被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、藥物篩選、細(xì)胞治療等領(lǐng)域。
在使用4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)時(shí)，首先需要選擇適合自己實(shí)驗(yàn)樣品的Nucleocuvette®試管。隨后，將目標(biāo)細(xì)胞接種在Nucleocuvette®試管中，并加入所需的外源DNA或RNA。接下來，設(shè)置適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)染程序，包括不同的脈沖電場(chǎng)強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間和間隔時(shí)間。最后，將Nucleocuvette®試管放置在相應(yīng)的設(shè)備中，進(jìn)行電脈沖轉(zhuǎn)染。整個(gè)過程只需幾分鐘即可完成。
4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)主要包括以下幾個(gè)方面：
1.高轉(zhuǎn)染效率：4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)90%以上的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率，遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法。
2.細(xì)胞存活率高：由于該系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞的影響較小，因此轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較高，能夠保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和有效性。
3.可控性強(qiáng)：4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要對(duì)脈沖電場(chǎng)強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間和間隔時(shí)間進(jìn)行精確控制，從而實(shí)現(xiàn)更加精準(zhǔn)的轉(zhuǎn)染。
4.適用范圍廣：該系統(tǒng)適用于各種類型的細(xì)胞，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞等，具有較高的通用性。
