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NIH干細胞中心主任介紹如何提高iPSC克隆率

閱讀:561        上傳時間:2021/11/11

Nature Methods

Namocell助力NIH發現保護iPSC活性的小分子組合CEPT

 

誘導型多能干細胞(iPSCs)具有強大的自我更新能力。從理論上講,人類多能干細胞是可以一直生長的細胞,是大腦、腎臟和心臟等特殊細胞取之不盡、用之不竭的來源。自2006年日本科學家山中伸彌成功通過對成體細胞重編程得到誘導型多能干細胞以來,越來越多的科學家潛心這一研究領域,為人類戰勝多種疾病提供了更多可能。

雖然誘導型多能干細胞前景廣闊,但是由于其在體外培養時對于環境擾動高度敏感,生長和分化都極易受到很大影響,給iPS細胞的研究造成重重阻礙。因此,目前亟待解決的主要問題就是要確保這些細胞能夠長期安全健康地生長和分化。

20215月,美國國立衛生研究院(NIH)國家轉化科學促進中心(NCATS)干細胞轉化中心實驗室主任Ilyas Singe?和他的團隊在《Nature Methods》上發表了他們的重大發現:一種四個小分子組合CEPT,可以保護誘導型多能干細胞,使其免受外部環境干擾,維持正常的細胞結構和功能,促進細胞生長。CEPT將大大提高誘導型多能干細胞在疾病治療(如糖尿病、帕金森病,脊髓損傷等)、基因編輯等多個領域的應用。

研究人員利用高通量篩選技術,系統地測試了大量藥物與化合物,發現CEPT這一組合極大地提高了干細胞的存活率。Singe?博士說, 單細胞克隆對于干細胞生物學至關重要。雖然大批量培養干細胞比較容易,但單細胞克隆,也就是在細胞培養板的一個小孔中一次培養一個細胞,對細胞壓力極大,通常生長率極低。在篩選中,研究團隊在平板孔中測試了15,333種藥物和化合物對iPS細胞的保護作用。為了模擬單細胞克隆過程中出現的對于細胞的壓力,他們開發了一種新的分析方法,篩選了7599種化合物對于10個細胞生長的作用。使用這種高通量低密度的檢測方法,研究團隊最終發現了保護iPS細胞生長的小分子組合CEPT。文中指出,研究團隊使用了Namocell單細胞分離儀(Single Cell Dispenser),以其快速、輕柔、簡便的單細胞分選技術,幫助他們提高了單克隆分析能力,極大地加快了他們的研究進程。


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