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上海單細胞分離日趨火爆的原因有哪些？
閱讀：518 發布時間：2020-2-5
上海單細胞分離日趨火爆的原因有哪些？
上海單細胞分離從異質性的細胞群體中分離單細胞，目前主要有三種選擇：手動分離、熒光激活細胞分選和微流體技術。當然，除了成熟的方法，巧妙的新方法也在不斷涌現，能以更高的準確性和特異性來分離單細胞。
如果你想要的細胞已經處于懸浮狀態（比如循環腫瘤細胞），而且含量相對比較豐富，那么流式分選將是你的理想選擇。如果樣本是實體組織，我們可以用酶分解掉膠原和其他細胞外蛋白。不過，酶學消化對細胞影響較大，甚至可能改變基因轉錄情況。把組織細胞制備成懸液之后，我們就可以通過特異性的熒光標簽分離出自己想要的細胞。進一步拿到單細胞是比較棘手的一步，也許要借助微流體設備。
將細胞分散到懸液中，會失去它們在組織里的位置信息。如果你想了解單細胞所處的環境和它們以前的鄰居，就需要用到激光捕獲顯微切割技術。這種技術通過掃描組織切片來定位感興趣的細胞，并將其提取出來。操作者需要非常小心，以免切到細胞或細胞核。數量極為稀少的細胞只能用毛細管等器具手動獲取。
上海單細胞分離優點：1. 細胞表面標志物的特異標記。2. 多個同時存在的標記可確保特定細胞的分離。3. 可將細胞分選至96孔或384孔板，純度接近100%
單細胞測序日趨火爆的原因很大程度上得益于單細胞分離技術的不斷完善。利用激光顯微切割儀，操作者可以將組織內單一細胞或細胞群切割下來進行研究，避免間質細胞及一些炎癥細胞造成背景“污染”，可以了解到細胞的位置信息。但該方法相鄰細胞容易污染，另外在組織固定及激光切割的過程中可能會破壞細胞的完整性，對細胞核酸損傷較大，從而影響后續的遺傳物質的擴增。