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培養基凍干的步驟

2023-12-14 閱讀(264)

1.所有凍干培養基、保護劑以及容器等均需高溫高壓滅菌。高壓滅菌前,在試管內貼上印有培養物標識的紙標簽。或者,使用帶無菌帽的試管

2.取一環分離后所得到的細菌菌液或者是甘油保存的菌液,在細菌培養板上分區或者使用蛇形劃板,37℃倒置培養并過夜
3.取一只干凈并且進行高溫高壓滅菌后的試管,倒入大約10ml的細菌培養液(大腸桿菌用磅培養液),從過夜培養后的培養平板中取一個單菌落至該培養液中后,在37℃溫度條件下振蕩培養過夜
4.10支清洗干凈且進行滅菌處理后的西林瓶,每個西林瓶中加入 1ml的凍干保護劑,后加入過夜培養后的1ml 菌液,蓋上無菌橡膠塞,備注:需要保留出氣孔,并做好標記后,存放于-80℃冰箱冷凍存儲
5.細菌凍干機預熱約30分鐘后,迅速將已冷凍的菌液放在細菌凍干機上,打印幾小時至十幾小時不等細菌已凍干。
6.凍干后關閉凍干機,取出已經凍干好的細菌,壓蓋密封,存儲在 -80℃條件下超低溫冰箱保存,可存放數年。




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