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上海吉至生化科技有限公司

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Masson 三色染色試劑盒染色原理方法

2018-12-12 閱讀(471)

結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維:膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維、而膠原纖維(collagen  fiber)是分布廣、含量多的一種纖維。

     Masson三色染色是結(jié)締組織染色中經(jīng)典的一種方法,是顯示組織中纖維的主要方法之一,是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān),分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色或藍色,主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

Masson 三色染色試劑盒主要成份:  

1.weigert鐵蘇木素A液 

2.weigert鐵蘇木素B液 

3.麗春紅酸性品紅染液 

4.磷鉬酸溶液 

5.苯胺藍溶液

樣本要求:  組織片充分固定和脫蠟。  

Masson 三色染色試劑盒染色方法:  

1.組織固定于bouin氏液或zenker氏液,流水沖洗過夜,常規(guī)脫水包埋 

2.切片脫蠟水 

3.weigert鐵蘇木素(weigert鐵蘇木素A、B液等比例混和)染5-10分,流水稍洗

4. 1%鹽酸酒精分化,流水沖洗數(shù)分 

5. 麗春紅酸性品紅染液染5-10分,流水稍沖洗。 

6.磷鉬酸溶液處理約5分鐘,不用水洗,直接用苯胺藍人染液復(fù)染5分鐘  

7. 1%冰醋酸處理1分鐘,95%酒精脫水多次。.*脫水、二甲苯透明,中性樹膠封固。 

Masson 三色染色檢驗結(jié)果:

  膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色,肌纖維、纖維素和紅細胞染紅色、胞核染藍黑色。、

注意事項: 

1.weigert鐵蘇木素分A、B兩液,應(yīng)與臨用前將兩液等分混合,而不宜預(yù)先混合,否則容易氧化沉淀而逐漸失去染色能力。 

2.組織用bouin氏液或zenker氏液固定為佳,如已用10%甲醛液固定,切片可在脫蠟水后,再放入bouin氏液作用一晚或置37℃溫箱內(nèi)1-2小時,然后流水沖洗切片黃色消失再進行染色。 

3.磷鉬酸處理時,要鏡下控制,見肌纖維呈紅色,膠原纖維呈淡紅色即可。

 



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