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液相色譜等度梯度有什么不同

閱讀:4679      發(fā)布時間:2019-12-21
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新手學液相色譜,會碰到兩種洗脫方式:等度洗脫和梯度洗脫,什么情況下會用到等度,哪些條件下用梯度,有什么不同?

1、洗脫的改變與不改變的配比不同

等度洗脫:流動相的組成比例和流速恒定不變。

梯度洗脫:改變流動相的濃度配比。

2、它們的定義不同

等度洗脫定義:液相色譜操作中,等度洗脫即在樣品組分的分析周期中,流動相的組成比例和流速恒定不變的洗脫方式。與梯度洗脫對應(yīng)。

梯度洗脫定義:梯度洗脫又稱為梯度淋洗或程序洗脫。在同一個分析周期中,按一定程度不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。

用梯度洗脫還是等度洗脫,主要看雜質(zhì)的情況。同一物質(zhì)有梯度洗脫和等度洗脫兩種條件時,梯度洗脫的認可度較高。雜質(zhì)與雜質(zhì)、主峰、溶劑峰的分離度一定要好(不好的話就要用梯度洗脫)。

1、雜質(zhì)和主成分極性相差很大,雜質(zhì)一定要全部都能洗脫出來(有時等度情況下沖兩三個小時雜質(zhì)也沖出不來,就必須考慮用梯度)。

2、雜質(zhì)和主成分極性相差較大雜質(zhì)出峰太晚(等度沖兩個小時出來個雜質(zhì),就可以通過梯度縮短檢樣時間

3、還有就是雜質(zhì)極性比主峰的大,等度時要想主峰時間合適雜質(zhì)全堆在前邊,雜質(zhì)分開主峰又出峰太晚,這種情況也得考慮梯度洗脫。

在能達到較好的分離度的情況下能用等度就用等度,用梯度要麻煩一些

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