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氣相色譜分析開發方法

閱讀:2050      發布時間:2019-10-11
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GC開發基本步驟方法圖

 

氣相色譜分析開發基本思路和方法:

1、樣品來源與與處理方法

氣相色譜能直接分析的樣品必須是氣體或液體,固體樣品分析前應溶解在適當溶劑中,且保證樣品不含氣相不能分析的組分(如無機鹽)或可能會損壞色譜柱的成分。

如果能確定樣品可以直接分析,那問題就簡單多了。只需要找一種合適的溶劑,比如bingtong、lvfang、己烷與苯等氣相色譜常見的溶劑。

一般來說溶劑應該具有較低的沸點,從而使其容易與樣品分離。盡可能避免用水、二氯甲烷和甲醇做溶劑,因為他們對延長色譜柱的使用壽命不利。另外毛細管色譜柱分析時,樣品濃度不能太高,否則會造成柱超載,通常樣品濃度為mg/ml或者更低。

如果樣品中有不能直接用氣相色譜分析的組分,或者樣品濃度過低,就必須采取一些預處理手段,包括萃取、濃縮、提純等。

2、氣相色譜儀配置

確定樣品氣相分析方法所需要的進樣裝置、載氣、色譜柱與檢測器。比如測定氣體揮發性成分就需要頂空進樣器,測定痕量有機氯就需要ECD檢測器。

而色譜柱的選擇則是這其中的重中之重,毛細管色譜柱的固定相分為極性、非極性、中等極性與PLOT等。   

3、確定儀器操作條件

確定樣品氣相色譜分析初始分離條件,包括進樣量、進樣口溫度、檢測器溫度、色譜柱溫度與載氣流速。
a.進樣量根據樣品濃度、色譜柱容量與檢測器靈敏度來確定。樣品濃度不超過mg/ml時,分流比為50:1時,毛細管色譜柱的進樣量一般不超過2μl。如果達不到檢測器靈敏度要求可以考慮加大進樣量,但以不超載為限。必要時可以對樣品進行濃縮或者采用大體積進樣技術等。

b.進樣口溫度主要由樣品沸點范圍決定,同時考慮色譜柱的使用溫度。首先要保證樣品全部汽化,其次保證汽化的樣品組分能夠全部流出色譜柱而不會在柱中冷凝。原則上來說進樣口溫度高一些比較有利,一般要接近樣品中沸點zui高組分的沸點,但要低于易分解組分的分解溫度,一般在250℃-350℃之間。實際操作中,進樣口溫度可在一定范圍內設定,只要保證樣品*汽化即可,而不需要jing確的優化。

c.色譜柱溫度的確定主要由樣品的復雜程度和汽化溫度決定。原則是既要保證待測物的*分離,又要保證所有組分都能流出色譜柱,且分析時間越短越好。組成簡單的樣品可用恒溫分析,分析周期短且基線較穩定,但是實際操作中多數需要采用程序升溫分離,這也是毛細管色譜柱zui大的優點之一,就是可以在較寬的溫度范圍內操作,亦可以保證待測組分的分離又可以見可能的縮短分析時間。一般來講,色譜柱的初始溫度英語組分中zui輕組分的沸點相接近,而終溫則取決于zui終組分的沸點。升溫速率則已樣品的復雜程度決定。

d.檢測器溫度是指檢測器加熱塊溫度,而非檢測點。檢測溫度設置的原則是保證流出色譜柱的組分不會冷凝,同時滿足檢測器靈敏度的要求。大部分檢測器的靈敏度受溫度影響不大,故檢測器溫度可參見色譜柱的zui高溫度設定,而無需jing確優化。

e.載氣流速可按照比*流速(N2為20,He為25,H2為30)高10%來設定。后按照具體分離情況而調整,下面是毛細管色譜柱接FID檢測器時的載氣柱前壓參考值:空氣300-400ml/min,氫氣30-40ml/min,氮氣(尾吹氣)30-40ml/min。

4、樣品分離條件的優化

當儀器配置與樣品確定之后,技術人員主要做的條件優化工作一般是改變柱溫與載氣流速,直至調整色譜柱類型,以達到的分離效果,柱溫比載氣流速對分離效果的影響更大。

 

文章摘自食品儀器分析

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