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液相色譜柱C18使用問題集錦

閱讀:2876      發布時間:2018-9-12
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問:正常使用一個C18液相色譜柱能用多長時間?

答:柱壽命一般不按時間計算,按持續進樣針數比較科學。一般正常使用維護,不超過pH和溫度等范圍,C18柱能達到500-2000針進樣的壽命,視樣品干凈程度的不同而不同。

問:一根常用的c18色譜柱,拿到一根新柱的時候應該怎樣進行活化及維護?為什么要這樣做?

答:新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡,特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為分子量高的物質分子,擴散速度慢,平衡所需時間也相應較長。具體平衡方式也很簡單,多進幾次樣品,直到峰面積和保留時間穩定,再進行正式進樣測定。

如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續進樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。

問:做農藥殘留分析的,不同的基質雜質含量是不同的,我用C18分析時有可能一次就污染了,我用高流速,和反向沖洗都解決不了,是不是這根柱子就廢了,有沒有其他的辦法?

答:高流速反向沖洗是對的,關鍵你用了什么溶劑沖洗呢?用原來的流動相沖洗肯定不管用,要不然就不會累積在柱子上了。你應該用流動相中的強溶劑B沖洗,如果不行,就需要啟用再生的程序,當然再生時用的溶劑更強。

 

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