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技術文章

ELISA檢測試劑盒適用范圍及樣品收集

閱讀:243          發布時間:2023-9-8

適用范圍:
1.適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
2.可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞等
3.可檢測指標齊全:白介素,干擾素,血管緊張素,肺炎衣原體,趨化因子、生長因子基質金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素等等指標。

樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集
血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融。
8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。

洗板方法:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4 mL注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

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