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技術文章

ELISA試劑盒的原理

閱讀:428          發布時間:2020-5-25

ELISA試劑盒為捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內毒素的單抗,研究者以刺激劑激活細胞時,不會影響活化細胞分泌細胞因子。ELISA試劑盒的原理是什么?

到目前為止,ELISA法仍在研究當中占有著主流地位,普遍應用使得實驗更加方便、經濟和準確, ELISPOT技術的優點也決定了它的發展潛力。LISPOT法來源于ELISA,相比較傳統的ELISA法有所突破,是定量ELISA技術的延伸和發展。由于游離的循環抗體或CK的半哀期不同,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結合,傳統的酶聯免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內的抗體及CK的水平。80年代,國外的科研工作者根據ELISA技術的基本原理,建立了體外檢測特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯免疫斑點技術(ELISPOT)。 人類原態胚胎干細胞無需轉基因就能逃避分化,通過OCT4,KLF4,KLF2三種因子的表達可以維持其天然狀態。研究人員利用兔ELISA試劑盒兩種生成非轉基因原態人類胚胎干細胞(hESCs)的方法路徑。他們在加入初始培養基之前,首先令后致敏狀態的人類胚胎干細胞接觸組蛋白去乙酰酶抑制劑,這樣初始培養條件下的八細胞胚胎就能直接建立一種新細胞系。

ELISA試劑盒的原理包括了可以提了兩款改良型siRNA用于活體轉染。可以增加siRNA-轉運試劑復合體的穩定性。而SIRNAPLUS則不需要轉運試劑,其轉運載體就整合在siRNA分子上。為了解決這一問題,公司開發了一個試劑盒,可以將shRNA插入到基因組的特定位置。這一靶向整合試劑盒采用鋅指核酸酶技術,將shRNAELISA試劑盒插入到人類基因組的AAVS1位點。這一技術將shRNA定位在一個地方,使影響shRNA表達水平的一個重要變量固定下來。

ELISA試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗。在這種方法中,通常標準配體是固定的,通過加入溶液相受體或蛋白質來使之成鍵。通過加入與受體特異性反應的抗體來定量成鍵的受體,而且一開始抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測量。第二種抗體能識別抗體的末端,在其末端的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發生反應,從而使溶液顯色。  

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