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詳細介紹
培養操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
MI-773 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1～3天 |
商品介紹：
MI-773是一種MDM2-p53相互作用抑制劑，高親和力結合到MDM2，Ki為0.88nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1303607-07-9 純度：98.0% 分子量：562.5 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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MDM2-p53相互作用抑制劑(MI-773)單寧
其他鞣；丹寧；單寧酯酰水解
英文名稱：Tannase from Aspergillus ficuum
其他英文名稱：Tannin acyl Hydrolase
產品規格：BR，200u/g
包裝：1克
CAS號：9025-71-2
級別：BR
活力：≥200 U/g
活力定義：1 U corresponds to the amount of enzyme which changes the absorbance at 310 nm by 1.0 per minute at pH 4.7 and 30°C (tannic acid as substrate, final volume 3 ml)
Total impurities：25 mM potassium phosphate；250 mM NaCl；50% glycerol
性狀：粉末，由曲霉屬等微生物發酵
用途：生化研究。可水解沒食子單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵，生成沒食子和葡萄糖
性狀：至淡黃色粉末或夾帶顆粒粉末，存在于多種酵母和其他以及植物中。本品從酵母中提取，可使蔗糖分解成葡萄糖和果糖，從而得到比蔗糖的溶解度更高、不易有結晶析出的高濃度轉化糖漿。
用途：生化研究。能催化蔗糖水解為葡萄糖和果糖的；它還能將密三糖水解為密二糖和果糖
保存：2～8℃，保質期1年
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