成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊

當前位置:
上海撫生實業有限公司>技術文章>PCR反應主要五種物質

技術文章

PCR反應主要五種物質

閱讀:687          發布時間:2023-3-13

PCR反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+。

1、引物量: 每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以zui低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2、酶及其濃度 目前有兩種Taq DNA聚合酶供應, 一種是從棲熱水生桿菌中提純的天然酶,另一種為大腸菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反應約需酶量2.5U(指總反應體積為100ul時),濃度過高可引起非特異性擴增,濃度過低則合成產物量減少。
3、dNTP的質量與濃度 dNTP的質量與濃度和PCR擴增效率有密切關系,dNTP粉呈顆粒狀,如保存不當易變性失去生物學活性。dNTP溶液呈酸性,使用時應配成高濃度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的緩沖液將其PH調節到7.0~7.5,小量分裝, -20℃冰凍保存。多次凍融會使dNTP降解。在PCR反應中,dNTP應為50~200umol/L,尤其是注意4種dNTP的濃度要相等( 等摩爾配制),如其中任何一種濃度不同于其它幾種時(偏高或偏低),就會引起錯配。濃度過低又會降低PCR產物的產量。dNTP能與Mg2+結合,使游離的Mg2+濃度降低。
4、模板(靶基因)核酸 模板核酸的量與純化程度,是PCR成敗與否的關鍵環節之一,傳統的DNA純化方法通常采用SDS和蛋白酶K來消化處理標本。SDS的主要功能是:溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質結合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白,再用有機溶劑酚與氯仿抽提掉蛋白質和其它細胞組份,用乙醇或異丙醇沉淀核酸。提取的核酸即可作為模板用于PCR反應。一般臨床檢測標本,可采用快速簡便的方法溶解細胞,裂解病原體,消化除去染色體的蛋白質使靶基因游離,直接用于PCR擴增。RNA模板提取一般采用異硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。
5、Mg2+濃度 Mg2+對PCR擴增的特異性和產量有顯著的影響,在一般的PCR反應中,各種dNTP濃度為200umol/L時,Mg2+濃度為1.5~2.0mmol/L為宜。Mg2+濃度過高,反應特異性降低,出現非特異擴增,濃度過低會降低Taq DNA聚合酶的活性,使反應產物減少。

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

對比框

產品對比 產品對比 聯系電話 二維碼 意見反饋 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪
021-52961052
在線留言
主站蜘蛛池模板: 国产精品久久久久久天| 亚洲天堂视频在线观看| 51吃瓜网今日吃瓜资源| 乱码国产丰满人妻WWW| 亚洲五月综合缴情综合久久本| 51吃瓜网永久发布地址| 一二三四观看视频社区在线| 久久精品66免费99精品| 日韩免费三级电影| 一级黄色毛片| 色涩影院无码av| 亚洲欧美自拍另类图片色| 一二三区理论片| 伴娘被按在车内强行摸胸猥亵| 国产精品美女WWW爽爽爽视频| 国产精品麻豆入口92| 网友自拍区视频精品| 亚洲VA天堂VA欧美片A在线| 一本无码人妻在中文字幕免费| 久久国产成人午夜AV浪潮| 亚洲精品久久久久久一区| 欧美人与动牲交A精品| 国产无套精品一区二区| 影音先锋资av男人撸| 日韩国产欧美在线一区| 车后座坐腿上猛烈进出| 98国产精品人妻无码免费| 国产精品久久久久久超碰| 黄桃网站进入页面直播| 日韩一级片久久| 欧美激情刺激爽免费视频观看| 偷拍自偷 亚洲 欧美20P| 久久久久久最新| 好男人社区神马WWW在线观看| 少妇人妻真实偷人精品视频| 黄色片网站下载| 日韩精品在线中文字幕| 日韩欧美一级片大全| 久久人妻av有码中文字幕| 亚洲天堂1区2区| 少妇真人直播免费视频|