化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
血清不穩(wěn)定原因及解決辦法參考
閱讀：274 發(fā)布時間：2023-3-6血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離 出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。
血清最大的劣勢就是不穩(wěn)定，不穩(wěn)定原因如下：
1、來源不穩(wěn)定
以胎牛血清為例，懷孕母牛在屠宰前腹部被剖開，取出胎牛，在低溫?zé)o菌條件下，刺破胎牛的心臟以獲取血清。就這一條，動物倫理組織就可以把你攔住嘮嘮。另外，牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家，我國在對牛血清的質(zhì)量《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 2000》中提出比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求，包括蛋白質(zhì)含量，細(xì)菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)毒素，細(xì)胞增殖支持等檢查。
2、組分不穩(wěn)定
還有最讓人鬧心的，動物血清成分復(fù)雜，其組分及含量常和動物性別（公胎牛，母胎牛，如激素）、年齡、生理狀態(tài)、營養(yǎng)條件不同而有差異，是不是覺得特像中藥。還有，盡管血清大部分成分是已知的，但仍然存在不清楚的組分，所以導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)化極其困難。所以，不同的血清差異很大，就是同一的不同批次血清差異也很大。
3、用法不穩(wěn)定
實(shí)驗(yàn)習(xí)慣的不同，都可能導(dǎo)致細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不穩(wěn)定，比如，有人四度過夜融化，有人急性子，直接扔進(jìn)水浴鍋。新手拿到一瓶血清，第一個問題就是問自己，要不要滅活？血清同時含有內(nèi)毒素、血色素、補(bǔ)體、抗體等其他有害成分，影響細(xì)胞生長甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡，對某些實(shí)驗(yàn)來說，極為重要。
如此的不穩(wěn)定，該怎么在實(shí)驗(yàn)過程中盡可能的解決呢？
1、土豪和有得選擇的實(shí)驗(yàn)室，請選擇無血清培養(yǎng)基。
2、不要頻繁更換血清牌子，不同血清來源，工藝，包裝運(yùn)輸?shù)榷加泻艽蟛町?，盡量不要更換牌子。
3、選定品牌后，對于經(jīng)過測試過的好用的血清，同一個批次多囤積一些，計算本次實(shí)驗(yàn)的大概用量，然后在多加20%的儲備，放在-20或-80度保存。
4、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)建議每個人用自己的培養(yǎng)基，PBS，胰酶等試劑以及用具，保持實(shí)驗(yàn)條件一致性，避免交叉污染，別給自己添堵，也別給別人添堵。
5、如果實(shí)在要更換血清，先將細(xì)胞在新的血清里傳兩到三代，適應(yīng)新的條件后，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。