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小鼠ELISA試劑盒步驟說明
閱讀：230 發(fā)布時間：2021-3-10小鼠ELISA試劑盒操作步驟：
1． 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目。
2． 將倍比稀釋的標準品各0.1ml依次參與一排7孔中，1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔參與。
3． 酶標板加上蓋，37℃反應(yīng)90分鐘。
4． 反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體；或甩去酶標板內(nèi)液體，再對著吸水紙拍幾下。洗刷2次。
5． 將準備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次參與。37℃反應(yīng)60分鐘。
6． 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷3次，每次浸泡1分鐘左右。
7． 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次參與。37℃反應(yīng)30分鐘。
8． 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷5次，每次浸泡1-2分鐘左右。
9． 按每孔0.1ml依次參與TMB顯色工作液，37℃避光反應(yīng)，反應(yīng)過程中，ELISA試劑盒要常常的調(diào)查，當肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔不同不明顯時，即可參與TMB終止液0.1ml/孔。（顯色反應(yīng)長不要超越30分鐘）。
10． 用酶標儀在450nm測定O.D.值。
11． 依據(jù)樣品的吸光值在坐標上找出對應(yīng)的濃度。用戶也能夠運用各種應(yīng)用軟件來核算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍，其實踐濃度應(yīng)該×N。
小鼠ELISA試劑盒注意事項
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋，未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶，使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
8.不同批號試劑組分不得混用。