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小鼠ELISA試劑盒*啦

閱讀:311          發布時間:2018-7-23

小鼠ELISA試劑盒*啦
Calcein-AM是一種對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑,發綠色熒光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在傳統的Calcein(鈣黃綠素)基礎上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團,增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細胞膜。一旦進入細胞后,Calcein-AM(本身不發熒光)被細胞內的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein,從而被滯留在細胞內并發出強綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM細胞毒性極低,是適合用于活細胞染色的熒光探針,而且不會抑制任何的細胞功能,如增殖和淋巴球的趨化性。
由于死細胞缺乏酯酶,Calcein-AM僅用于對活細胞的細胞生存能力測試和短期標記。因此,Calcein-AM常常與死細胞熒光探針如碘化丙啶(PI)等聯合使用,同時進行活細胞和死細胞的熒光雙重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿過活細胞的細胞膜,僅能穿過死細胞膜的無序區域而到達細胞核,并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產生紅色熒光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發,因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。而用545 nm激發,僅可觀察到死細胞。
本試劑盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的雙重染料,來進行活細胞和死細胞的雙重染色標記,從而進行活細胞和死細胞水平的分析。根據我司優化的實驗體系,單次就200µl細胞懸液進行染色,分別可以做500次和1000次檢測。
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