詳細介紹
兔結腸成纖維原代細胞
兔結腸成纖維細胞分離自結腸組織;結腸在右髂窩內續于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結締組織),肌層(內環形、外縱行兩層平滑?。饽ぃɡw維膜或漿膜)。結腸成纖維細胞主要分布于外膜(纖維膜或漿膜)結締組織內。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的結腸成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
英文名稱 | Rabbit Colonic Fibroblast Cells | 組織來源 | 結腸 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7973 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:兔結腸成纖維細胞
組織來源:結腸
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
培養基:含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔結腸成纖維細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的兔結腸成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔結腸成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1) | 凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體 |
G蛋白偶聯受體101抗體 | 酰基轉移酶1抗體 |
抑癌蛋白AIMP3抗體 | 纖維細胞生長因子結合蛋白抗體 |
乳腺癌增強蛋白2抗體 | 凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體 |
纖維細胞生長因子結合蛋白抗體 | 酰基轉移酶1抗體 |
CC Others Human 人 CC / chymoypsin C 人細胞裂解液 (陽性對照) | EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人骨骼肌細胞總RNAHSkMC NA | EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肺細胞;HLF-a 人胰腺上皮細胞培養基 100mL | CD6 Others Mouse 小鼠 CD6 / TP120 人細胞裂解液 (陽性對照) |
RPE Others Human 人 RPE / RPE2-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | A2780細胞,人卵巢癌細胞 鮭魚胚胎細胞,CHSE細胞 腦微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0927 | 兔結腸成纖維原代細胞纖維細胞生長因子結合蛋白抗體 |
HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞 小鼠成纖維細胞,Y2細胞 NK-92MI(人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞) | 人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T] |
人前列腺癌細胞;LNCaP | TNFRSF11B Others Cynomolgus 食蟹猴 Osteoprotegerin / TNFRSF11B 人細胞裂解液 (陽性對照) |
hMNC-CB-c pooledula-pure 臍帶血來源的人類單核細胞 人前列腺微血管內皮細胞HPrMEC | Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體 |
乳腺癌增強蛋白2抗體 | CL-0094HCC827(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
G蛋白偶聯受體101抗體 | 抑癌蛋白AIMP3抗體 |
Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體 | CC Others Human 人 CC / chymoypsin C 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。