詳細介紹
大鼠羊膜間充質干原代細胞
大鼠羊膜間充質干細胞分離自胎盤羊膜組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的內層,與眼結膜組織結構相似,含有眼表上皮細胞,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,無血管、及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,均具有多分化潛能,可轉化為元,且還有合成、釋放生物活性物質和營養因子的功能。
英文名稱 | Rat Amniotic Mesenchymal Stem Cells | 組織來源 | 羊膜 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X8273 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:大鼠羊膜間充質干細胞
組織來源:羊膜
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠羊膜間充質干細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的大鼠羊膜間充質干采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的大鼠羊膜間充質干經CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
大鼠胰島素樣生長因子1(IGF1)試劑盒 ,英文名: IGF1 ELISA Kit
Mouse brain derived neuroophic factor (BDNF) ELISA Kit 小鼠腦源性營養因子(BDNF)試劑盒
Mouseierleukin8,IL-8ELISAKit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人唾液
細胞BLK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMPR-1A大鼠骨成型蛋白受體1A
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)試劑盒
HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量細胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Guineapigierleukin4,IL-4試劑盒豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學發光法定量試劑盒20次
Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit小鼠酶2(CA-2)試劑盒規格:96T/48T
小量DNA產物化試劑盒 Small DNA product purification kit
小量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 Small agarose gel DNA recycling Kit
大量DNA產物化試劑盒 A lot of DNA product purification kit
多功能DNA化回收試劑盒 Multifunctional DNA purification and recycling Kit
FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
ADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 0.5mgADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原
WWP2重組人 WWP2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽)
EPCAM Protein Rat 重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 標簽)
ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 REG1A Others Human 人 REG1A / PSPS 人細胞裂解液 RSPO3 Protein Human 小鼠原代滑膜間充質干細胞 人原代腦皮層元細胞
大鼠羊膜間充質干原代細胞IL-23R(Interleukin-23 receptor 0.5mgIL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原
DPEP2 Protein Human 重組人 DPEP2 / MBD-2 蛋白
TSPAN7重組食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CD59A Protein Mouse 重組小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 (Fc 標簽)
PKM重組人 PKM2 / OIP3 蛋白 Protein
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。