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大鼠視網膜色素上皮原代細胞

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    上研生
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    上海市

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更新時間:2025-05-14 08:31:05瀏覽次數:51

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?
貨號 YS-01X7375 應用領域 化工,生物產業
主要用途 僅供科研實驗    
大鼠視網膜色素上皮原代細胞公司出售的產品:小鼠原代Ⅱ型肺泡上皮細胞 16HBE(人支氣管上皮樣細胞) BC-021 人癌細胞 1ml/T75 KMML1 小白鼠肺成纖維樣細胞 HEC-1-B 人內膜腺癌細胞 人原代外周血單個核細胞

詳細介紹

本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

大鼠視網膜色素上皮原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠視網膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠視網膜色素上皮經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

大鼠視網膜色素上皮原代細胞

組織來源

視網膜組織

英文名稱

Rat Retinal   Pigment Epithelial Cells

貨號

YS-01X7375

產品規格

5×10?Cells/T25培養瓶

用途

僅供科研實驗

 

大鼠視網膜色素上皮原代細胞
細胞簡介:

大鼠視網膜色素上皮細胞分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、節細胞層、纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視乳頭。視網膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個節細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的纖維跨越視網膜表面,經由視到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區,其分辨能力強。視網膜色素上皮(RPE)位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道;主要是由單層色素上皮細胞所構成,排列十分規則。視網膜色素上皮參與循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形,細胞分為三部分,即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力,細胞死亡后不被替換,而是鄰近的細胞向側面滑動,以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。

培養信息:

大鼠視網膜色素上皮原代細胞

包被條件 鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養基 FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

大鼠視網膜色素上皮原代細胞

細胞培養方法:

大鼠視網膜色素上皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

公司產品:大鼠視網膜色素上皮原代細胞

大鼠重肽鐵蛋白(FTH)試劑盒 ,英文名: FTH ELISA Kit

Mouse ai neuophil / cenosome aibody (ACA) ELISA Kit 小鼠抗粒/中心體抗體(ACA)試劑盒

MouseBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISAKit 小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanInsulieceptorsubsate2,IRS-2ELISAKit人胰島素受體底物2

微型RNA(miRNA)定量擴增分析試劑盒10/20

ELISAKitMIP-1α/CCL3大鼠巨噬細胞癥蛋白1α

小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human coagulation factor III (F III) ELISA Kit 人Ⅲ(F)試劑盒

HumanGliadinIgAELISAKit 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human15-lipoxygenase,15-LO/LOX試劑盒人15脂加氧酶(15-LO/LOX)試劑盒規格:96T/48T

真菌/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20

MouseAquaporin3,AQP-3ELISAKit小鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒規格:96T/48T

兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒   兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒   規格型號:96T/48T   兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒、兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

植物0脂酰甘油試劑盒   植物0脂酰甘油試劑盒   規格型號:96T/48T   植物0脂酰甘油試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:植物0脂酰甘油試劑盒、植物0脂酰甘油試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

   魚骨鈣素試劑盒   規格型號:96T/48T   魚骨鈣素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:魚骨鈣素試劑盒、魚   保存條件:2-8   保質期:6個月。

豌豆凝集素試劑盒   豌豆凝集素試劑盒   規格型號:96T/48T   豌豆凝集素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豌豆凝集素試劑盒、豌豆凝集素試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

EGF重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 Protein

ORX-A(orexin-A 0.5mgORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原

IFNG重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 Protein

CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白

FSTL1 Protein Mouse 重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標簽)

CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液   RF/6A(猴視網膜血管內皮細胞)     PCSK9 Others Mouse 小鼠 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液   SK-BR-3(人癌細胞) 小鼠原代臍帶間充質干細胞 大鼠原代卵巢內膜細胞

大鼠視網膜色素上皮原代細胞MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3 0.5mgMAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關蛋白輕鏈3抗原

GUCA1A Protein Human 重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標簽)

KLRK1重組食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 標簽) Protein

PTN Protein Mouse 重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白 (Fc 標簽)

FCGR3B重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein


操作步驟:

大鼠視網膜色素上皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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