大鼠神經小膠質原代細胞

大鼠神經小膠質細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積)；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質細胞是神經膠質細胞的一種，相當于腦和脊髓中的巨噬細胞，是中樞神經系統(tǒng)(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防線。小膠質細胞大約占大腦中的神經膠質細胞的20%，小膠質細胞不停地清除著中樞神經系統(tǒng)中的損壞的神經，斑塊及感染性物質。無數臨床上和理學研究表明激活的小膠質細胞在神經退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起神經毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源，如腫瘤壞死因子(TNF)，一氧化氮，白介素等有神經毒性的物質。神經小膠質細胞的主要功能：①神經膠質出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉化的過程中；②當程序性細胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經膠質可做為大腦的巨噬細胞；③膠質細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原，能進行Fc介導的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。

產品名稱：大鼠神經小膠質細胞

組織來源：腦組織

產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠神經小膠質采用酶消化法結合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數天后經搖床震蕩收集脫落細胞制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠神經小膠質經CD11b免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

大鼠組蛋白H2B(H2B)試劑盒 ，英文名： H2B ELISA Kit

Nude mouse alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

MouseProcalcitonin,PCTELISAKit 小鼠降鈣素原(PCT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit人淋巴細胞功能相關抗原3

土壤元素比色法定量試劑盒20次

ELISAKitAMA大鼠抗心肌抗體

豚鼠內皮素1(EDN1)試劑盒 ，英文名： EDN1 ELISA Kit

Human parathyroid hormone related peptide (PTHrp) ELISA Kit 人副甲狀旁腺激素相關肽(PTHrp)試劑盒

rabbitImmunoglobulinA,IgAELISAKit 兔子免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBALP(Humanbonealkalinephosphatase)ELISAKit人骨堿性0酸酶

線蟲β-半乳糖苷酶化學發(fā)光定量試劑盒20次

RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit兔子Ⅱ(FⅡ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔補體蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔p物質(SP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

FGFR3重組小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 Protein

CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴細胞衰減蛋白(抗原)

VSTM1重組人 VSTM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

PDCD1LG2 Protein Rat 重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞 人癌細胞，MCF7細胞 PT67(小鼠逆轉錄病毒包裝細胞)  FRhK-4(恒河猴胚細胞)     NRK-52E，大鼠腎細胞 Sars蛋白表達株，293sars181A細胞 NCI-H1703 [H1703](人肺癌細胞) 小鼠原代神經膠質細胞 大鼠原代牙齦成纖維細胞

大鼠神經小膠質原代細胞TrK A (h-NGFR 0.5mgTrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神經生長因子的一種(抗原)

GYPC Protein Human 重組人 GYPC / Glycophorin-C 蛋白

結晶紫染色液 100ml

NBL1 Protein Human 重組人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白

CD226重組人 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。