大鼠乳腺上皮原代細胞

大鼠乳腺上皮細胞分離自乳腺組織；乳腺是復管泡狀皮膚腺，主要由腺上皮細胞組成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，導管末梢發育成腺泡；近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發生都與乳腺上皮細胞（MEC）有密切聯系，體外分離培養MECs即成為研究開展的關鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織，乳腺由導管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發育是由體內激素和局部合成的生長因子共同調控，其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化、凋亡產生極大的影響。乳腺上皮細胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長型細胞，呈多角形、圓形以及短梭形；乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。

產品名稱：大鼠乳腺上皮細胞

組織來源：乳腺組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠乳腺上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

大鼠組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)試劑盒 ，英文名： TIMP4 ELISA Kit

Mouse ai thyroid stimulating hormone receptor aibody (Ab) ELISA Kit 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒

MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISAKit 小鼠乙型肝核心抗體(HBcAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanMaixGlaProtein,MGPELISAKit人基質γ羧基谷蛋白

透射電鏡(TEM)制片處理包埋液A液：10毫升B液：30毫升

ELISAKitGzms-B大鼠顆粒酶B

小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒

Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit 人孕酮受體(PGR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanChorionicGonadoophin,HCG試劑盒人絨毛膜(HCG)試劑盒規格：96T/48T

總微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒20次

HumanSalmonellatyphiaigen,St-AgELISAKit人傷寒抗原(St-Ag)試劑盒規格：96T/48T

小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒   96T/48T

小鼠戊糖素(Peosidine)試劑盒   96T/48T

小鼠胃泌酸調節素（OXM）試劑盒   96T/48T

小鼠胃泌素（GT）試劑盒   96T/48T

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182 0.5mgphospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 0酸化原活化蛋白激酶p38抗原

UCHL3重組人 UCHL3 / UCH-L3 蛋白 Protein

IL15 Protein Human 重組人 IL-15 / IL15 / Interleukin 15 蛋白

PVRL2 Protein Human 重組人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白

CM-R070大鼠尿道上皮細胞CM-M098小鼠內臟脂肪細胞DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / CD167 (aa 444-913) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   CALU Others Human 人 CALU / Calumenin 人細胞裂解液 小鼠原代腎上腺皮質細胞 人原代肺微血管平滑肌細胞

大鼠乳腺上皮原代細胞前列腺素E合酶(PTGES)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)

JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 (Fc 標簽)

SELE重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

ACOT13重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。