大鼠腸巨噬原代細胞

大鼠腸巨噬細胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態系統。巨噬細胞屬于免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內參與非特異性防衛(先天性免疫)和特異性防衛(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。

產品名稱：大鼠腸巨噬細胞

組織來源：腸組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 巨噬細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 （12mM）

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠腸巨噬采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠腸巨噬經CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒

Rat anaphylatoxin / compleme fragme 4a (C4a) ELISA Kit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)試劑盒

HumanactivatedproteinC,APCELISAKit 人活化蛋白C(APC)試劑盒 進口分裝

Chickenniicoxide,NO試劑盒雞(NO)試劑盒

載玻片細胞P35蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFollistatin,FSELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒

小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

cit瓜規格：96T/48T

載玻片細胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)試劑盒規格：96T/48T

腮腺病毒(MuV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

麻風桿菌(ML)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

普氏立克次體(RP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

莫氏立克次體(RM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素

TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標簽)

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

A-204細胞，人橫紋肌肉瘤細胞 兩歧雙歧桿菌 人肝永生化細胞;THLE-3  F81(貓細胞)     人羊膜間充質基質細胞 Sars蛋白表達株，293001A細胞 NCI-H596 [H596](人肺癌細胞)  CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株) 豬原代腎小球系膜細胞 大鼠原代胎盤間充質干細胞

大鼠腸巨噬原代細胞Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor 0.5mgKiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 轉移抑制基因(抗原)

ABHD10 Protein Human 重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標簽)

IL2RA重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (His 標簽) Protein

EGFR Protein Mouse 重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

CDON重組人 CDON / CDO 蛋白 (His 標簽) Protein