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大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-13 11:41:32瀏覽次數(shù):66

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7008 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代背根神經(jīng)元細(xì)胞 彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL 神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 A549 肺腺癌 Hela, 人細(xì)胞系 Human 豬原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠Ⅱ型肺泡上皮采用彈性蛋白酶灌注消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠Ⅱ型肺泡上皮經(jīng)SP-C免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞

組織來源

肺組織

英文名稱

Rat Alveolar Type   II Epithelial Cells

貨號

YS-01X7008

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 細(xì)胞簡介:

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分離自肺組織;肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。小肺泡細(xì)胞,又稱I型肺泡細(xì)胞,厚約0.1微米,基底部是基底膜,無增殖能力。大肺泡細(xì)胞,又稱Ⅱ型肺泡細(xì)胞,分泌表面活性物質(zhì)(二棕櫚酰),以降低肺泡表面張力。Ⅱ型肺泡細(xì)胞位于Ⅰ型肺泡細(xì)胞之間,數(shù)量較Ⅰ型肺泡細(xì)胞多,但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細(xì)胞小。細(xì)胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細(xì)胞核圓形,胞質(zhì)著色淺、呈泡沫狀。電鏡下,細(xì)胞游離而有少量微絨毛,胞質(zhì)內(nèi)富含線粒體和溶酶體,有較發(fā)達的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體。核上方有較多的分泌顆粒,電子密度高、大小不等,直徑約0.1-1.0μm顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結(jié)構(gòu),稱為嗜餓性板層小體。小體內(nèi)的主要成分為磷脂,以二棕櫚酰為主,此外還有糖胺多糖及蛋白質(zhì)等。顆粒內(nèi)物質(zhì)釋放出來后,在肺泡表面形成一層粘液層,稱為表面活性物質(zhì)(surfactant)。表面活性物質(zhì)有降低肺泡表面張力、穩(wěn)定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小,表面活性物質(zhì)密度增加,表面張力降低,防止肺泡過度塌陷;吸氣時肺泡擴張,表面活性物質(zhì)密度減小,肺泡回縮力加大,可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質(zhì)的缺乏或變性均可引起肺不張,過度通氣可造成表面活性物質(zhì)缺乏;吸入毒氣可直接破壞表面活性物質(zhì)。Ⅱ型肺泡細(xì)胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細(xì)胞的潛能,故具有修復(fù)受損傷上皮的作用。

大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

操作步驟:

大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞

豬肌球蛋白輕鏈0酸酶(MLCP)ELISA 試劑盒

Neuroophic factor glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒

Porcineacetylcholine,ACHELISAKit 豬乙酰(ACh)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAlphaNAG(MouseAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶

血液離子(K)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20

PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISAKit植物吲哚乙酸(IAA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 ,英文名: IL1Ra ELISA Kit

Human ubiquitin activating enzyme (E1/UBAE) ELISA Kit 人泛素激活酶(E1/UBAE)試劑盒

rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit 兔子白介素4(IL-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-CG(MouseChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit小鼠絨毛膜β

細(xì)菌乙醇比色法定量試劑盒20

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

人真核翻譯起始因子3a試劑盒   人真核翻譯起始因子3a試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人真核翻譯起始因子3a試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人真核翻譯起始因子3a試劑盒、人真核翻譯起始因子3a 試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

人長效甲狀腺刺激素試劑盒   人長效甲狀腺刺激素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人長效甲狀腺刺激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人長效甲狀腺刺激素試劑盒、人長效甲狀腺刺激素試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒   人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

人早老素2試劑盒   人早老素2試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人早老素2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人早老素2試劑盒、人早老素2 試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

REG1B重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體 0.5mgLOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體

KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AARSD1 Protein Human 重組人 AARSD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

KLK11 Protein Mouse 重組小鼠 KLK11 / Kallikrein-11 蛋白 (His 標(biāo)簽)

293A,人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級別)  中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-C 卵巢癌細(xì)胞,HO-8910細(xì)胞 CHO/dhFr-細(xì)胞,中國倉鼠腎細(xì)胞(二氫還原酶缺陷型)  ACO2 Others Human ACO2 / Aconitase 2 豬脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞 兔原代髓核細(xì)胞

大鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞MYOZ/MYOZ1(Myozenin 0.5mgMYOZ/MYOZ1(Myozenin)humanretmouse MYOZ抗原

KCNIP3 Protein Human 重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白

IL20RA重組狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白

COL2A1重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標(biāo)簽) Protein




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