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人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-12 14:55:15瀏覽次數(shù):129

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X6993 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠胰腺星狀原代細(xì)胞大鼠胰腺星狀原代細(xì)胞兔骺軟骨原代細(xì)胞人乳腺上皮原代細(xì)胞小鼠胰腺導(dǎo)管上皮原代細(xì)胞大鼠胰腺導(dǎo)管上皮原代細(xì)胞兔滑膜原代細(xì)胞人乳腺成纖維原代細(xì)胞小鼠頜下腺上皮原代細(xì)胞大鼠頜下腺上皮原

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

方法簡介:

實驗室分離的人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞組織來源肺組織
英文名稱Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells貨號YS-01X6993
產(chǎn)品規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶用途僅供科研實驗




人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
細(xì)胞簡介:

人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細(xì)胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細(xì)胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障,該屏障對于肺氣體交換,調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。

培養(yǎng)信息:

人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
包被條件PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)

培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳2-3代

消化液0.25%

人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

公司產(chǎn)品:人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

雞氣管上皮原代細(xì)胞Cyto-roGFP
人小氣道上皮原代細(xì)胞DB3.1 大腸桿菌
小鼠肺大動脈平滑肌原代細(xì)胞Dekkera naardenensis
大鼠肺大動脈平滑肌原代細(xì)胞DH10Bac大腸桿菌
兔肺動脈成纖維原代細(xì)胞DH10B大腸桿菌
雞骨骼肌原代細(xì)胞DH5α(含 pEGFP-N3粒)大腸桿菌
人肺成纖維原代細(xì)胞DH5α(含 pTrc99a質(zhì)粒)大腸桿菌
小鼠肺大動脈內(nèi)皮原代細(xì)胞DH5α(含 pTRE3G質(zhì)粒)大腸桿菌
大鼠肺大動脈內(nèi)皮原代細(xì)胞DH5α(含 pUCGm質(zhì)粒)大腸桿菌
兔肺泡巨噬原代細(xì)胞DH5α(含L4440載體)大腸桿菌
雞外周血單核原代細(xì)胞DH5α(含pACYC177質(zhì)粒)大腸桿菌
人支氣管平滑肌原代細(xì)胞DH5α(含pACYC184質(zhì)粒)大腸桿菌
小鼠肺動脈成纖維原代細(xì)胞DH5α(含pAN7-1質(zhì)粒)大腸桿菌
大鼠肺動脈成纖維原代細(xì)胞DH5α(含pBARGPE1質(zhì)粒)大腸桿菌
兔腹腔巨噬原代細(xì)胞DH5α(含pBiT1.1-N [TK-LgBiT]質(zhì)粒)大腸桿菌
人小氣道平滑肌原代細(xì)胞DH5α(含pBiT2.1-N [TK-SmBiT]]質(zhì)粒)大腸桿菌
小鼠肺大靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞DH5α(含pBR322質(zhì)粒)大腸桿菌
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞DH5α(含pCBASceI質(zhì)粒)大腸桿菌
兔骨骼肌原代細(xì)胞DH5α(含pcDNA3(1087)質(zhì)粒)大腸桿菌
人氣管平滑肌原代細(xì)胞人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞DH5α(含pcDNA3(1093)質(zhì)粒)大腸桿菌
兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干原代細(xì)胞DH5α(含pcDNA3.1(+)CircRNA Mini Vector質(zhì)粒)大腸桿菌

操作步驟:

人肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。


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