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詳細(xì)介紹
兔原代胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代胚胎成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代胚胎成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用兔原代胚胎成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
AMBP Others Human 人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | IgG/Bio 標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh ID3 DNA結(jié)合抑制因子3抗體 規(guī)格 0.2ml | Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 人癌標(biāo)志物-CA153Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
Anti-Phospho-eNOS (Ser1177) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化合成酶3抗體(內(nèi)皮型)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PGF ELISA Kit 大鼠前列腺素FMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
Rhesus antibody Rh phospho-KLF5(Ser311) 0酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-Layilin/FITC 熒光素標(biāo)記透明質(zhì)酸受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
EL(Mouse Endothelial lipase) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮脂肪酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | CATSPER： 陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml |
Anti-TSP-1/THBS1 敏感蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | CM-H061人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
PIEC細(xì)胞，豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,T84細(xì)胞 CM-H061人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 牛腎細(xì)胞;MDBK 人咽鱗癌細(xì)胞，FaDu細(xì)胞 Nb2-11細(xì)胞，小鼠淋巴瘤細(xì)胞 |
FOXO3A： 叉頭蛋白O3A抗體 0.2ml | HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Human major histocompatibility complex I ,MHC I /HLA I ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | ACE2 Others Human 人 ACE2 / ACEH 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人黑色素瘤細(xì)胞;A875 | XCL2 Protein Human 重組人 XCL2 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
Anti-HDAC7/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CHO-K1 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 |
Rhesus antibody Rh APLP2 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml | 兔原代胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基Ca Ski(人上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0014A-375(人惡性黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3] |
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T |
1.使用兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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