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技術文章

小鼠TNF-α高敏標準品樣品收集

閱讀:237          發布時間:2020-5-14

小鼠TNF-α高敏標準品樣品收集:

1.血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集 血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。

2.血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可 檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。

3.組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會 影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體 積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。 推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組 織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘, 取上清檢測。

4.細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。

5.其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測 具體處理方法可參考:

6.樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。

7.樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍 存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融。

8.如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品zui值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先 做預實驗,以確定稀釋倍數)。

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