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小鼠elisa檢測試劑盒標準操作要點

閱讀:450          發布時間:2018-11-15

      小鼠elisa檢測試劑盒無論在什么研究中,的試劑、良好的和正確的操作是保證ELISA 檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的純化水電導率小于1.5μs/cm。

A  標本的采取和保存
       大部分ELISA 檢測均以血清為標本。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG聚合,使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻并避免產生氣泡。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。抗凝不*的標本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。

 

B  加樣
       加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出。

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