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小鼠elisa檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)中應(yīng)用酶標(biāo)抗原的量較多

閱讀:332          發(fā)布時(shí)間:2018-11-6

     小鼠elisa檢測(cè)試劑盒被結(jié)合的酶標(biāo)抗原的量由酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來確定,如果待檢溶液中抗原越多,被結(jié)合的標(biāo)記抗原的量就越少,有色產(chǎn)物就減少,這樣根據(jù)有色產(chǎn)物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優(yōu)點(diǎn)在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測(cè);其主要不足在于每種抗原都要進(jìn)行酶標(biāo)記,而且因?yàn)榭乖慕Y(jié)構(gòu)不同,還需應(yīng)用不同的結(jié)合方法。此外試驗(yàn)中應(yīng)用酶標(biāo)抗原的量較多。

      其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 )表面,使酶標(biāo)記的抗原-抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。

1、競(jìng)爭ELISA試劑盒:此法主要用于測(cè)定小分子抗原及半抗原,其原理類似于放射免疫測(cè)定。
其基本程序?yàn)椋?br />① 抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 加入待檢抗原及一定量的酶標(biāo)抗原(對(duì)照孔僅加酶標(biāo)抗原)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液
④ 用ELISA試劑盒檢測(cè)儀測(cè)定OD值。

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