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技術文章

elisa檢測試劑盒酶聯免疫吸附試驗操作程序

閱讀:354          發布時間:2018-10-9

      elisa檢測試劑盒被結合的酶標抗原的量由酶催化底物反應產生有色產物的量來確定,如果待檢溶液中抗原越多,被結合的標記抗原的量就越少,有色產物就減少,這樣根據有色產物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優點在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測;其主要不足在于每種抗原都要進行酶標記,而且因為抗原的結構不同,還需應用不同的結合方法。此外試驗中應用酶標抗原的量較多。
競爭ELISA試劑盒:此法主要用于測定小分子抗原及半抗原,其原理類似于放射免疫測定。
其基本程序為:
① 抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 加入待檢抗原及一定量的酶標抗原(對照孔僅加酶標抗原)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液
④ 用ELISA試劑盒檢測儀測定OD值。

      前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。酶聯免疫吸附試驗:是酶免疫測定技術中應用zui廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體( 聚苯乙烯微量反應板 )表面,使酶標記的抗原-抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。

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