天狼星紅和快綠是一種用于區分膠原蛋白與其周圍物質的染料組合。天狼星紅專門綁定[Gly-X-Y]原纖維膠原的螺旋結構，無論膠原類型或種類如何，而Fast Green與非膠原結合蛋白質。通過利用這兩種染料的d特特征，Chondrex 提供了一種簡單的半定量測定試劑盒來測定培養細胞層和組織切片中膠原蛋白和非膠原蛋白的量（1-2）。因為該測定不需要膠原蛋白增溶，可用于測量各種組織中的總膠原蛋白含量（3-7）。由于天狼星紅和快綠分別在540 nm和605 nm處有吸收，因此提取的染料的OD值可用于計算樣品的膠原蛋白和非膠原蛋白含量。用于組織切片為10-20的一般組織學研究μm厚，膠原蛋白和非膠原蛋白的檢測靈敏度分別大于3μg/切片和50μg/切片。這個試劑盒中的試劑足以對30-50個樣本進行染色。

艾美捷天狼猩紅膠原蛋白染色試劑盒：

貨號：9046

描述：總膠原蛋白定量染色試劑盒

格式： 玻璃載玻片和細胞培養板

檢測類型： 染料染色

檢測時間： 根據樣本類型不同而有所變化

標準范圍： 膠原蛋白：每個切片3微克

非膠原蛋白質：每個切片50微克

樣本數量： 每個試劑盒可處理30-50個樣本

樣本類型： 培養細胞和組織切片

推薦樣本稀釋倍數： 不適用

顯色劑： 不適用（在540和605納米處讀取）

存儲： 室溫下可保存12個月

天狼猩紅膠原蛋白染色試劑盒試劑盒內容：

項目 數量 金額 存儲條件

染料溶液（90461） 1瓶 10毫升 室溫

染料提取緩沖液（90462） 2瓶 30毫升 室溫

計算結果：

要計算膠原蛋白的量，需要通過減去Fast Green在540 nm的貢獻來校正OD 540值，Fast Green在OD 605值中占29.1%。在OD 540和605下，膠原蛋白的顏色等效（OD值/μg蛋白）為0.0378，非膠原蛋白的為0.00204。

膠原蛋白（μg/節）=【OD 540 value – (OD 605 value x 0.291)】/0.0378

非膠原蛋白（μg/節）=OD 605 value/0.00204

注意事項1：較厚的切片在洗滌步驟中容易從載玻片上脫落，請仔細洗滌載玻片。此外，由于檢測靈敏度與載玻片上組織的表面積有關，切割較薄的切片不會顯著提高檢測靈敏度。

注意事項2：非膠原蛋白值可用于標準化樣本結果，因為蛋白質水平與樣本的表面積或細胞密度相關。

天狼猩紅膠原蛋白染色試劑盒文獻參考：

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