ALPCO超敏胰島素ELISA用于定量測定人血清和血漿中的胰島素。

艾美捷超靈敏胰島素ELISA（ALP-80-INSHUU-E01.1）檢測原理：

ALPCO超敏胰島素ELISA是一種夾心型免疫分析法。96孔微孔板被涂覆有特異性針對胰島素的單克隆抗體。標準品、樣本和對照品與檢測抗體一起加入微孔板孔中。然后，微孔板在室溫下放置在微孔板振蕩器上，以700-900轉每分鐘的速度振蕩。第一次孵育完成后，孔被洗滌緩沖液清洗并吸干。加入TMB底物，然后微孔板再次在室溫下以700-900轉每分鐘的速度振蕩。第二次孵育完成后，加入停止液，并通過分光光度計在450納米處測量光密度（OD）。生成的顏色強度與樣本中胰島素的含量成正比。

注意事項

1. 本試劑盒中包含的人血制品已檢測是否含有HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的絕對不存在；因此，所有試劑應被視為潛在傳染性物質。處理和處置應符合所有適當的國家和地方法規，以處理潛在的生物危害物質。

2. 所有來自動物源的材料均為BSE（瘋牛病）陰性。然而，所有材料應被視為潛在傳染性物質。

3. 避免直接接觸皮膚。

4. 本產品不得內服。

5. 使用本產品時，避免進食、飲水或吸煙。

6. 不要使用口吸移液管吸取任何試劑。

7. 試劑盒中的試劑是特定批次的，不得替換。

8. 不要使用超過有效期的試劑。

9. 不建議更改測試程序，可能會影響測試結果。

試劑準備

所有試劑在使用前必須平衡至室溫。洗滌緩沖液濃縮液需用20份蒸餾水稀釋。例如，要準備工作強度洗滌緩沖液，用400毫升去離子水稀釋20毫升洗滌緩沖液濃縮液（21倍）。工作強度洗滌緩沖液在室溫（18-25°C）下穩定4周。

糖尿病控制（1級）以凍干形式提供。請參考每個試劑盒附帶的分析證明，以獲取重懸的適當體積的去離子水。用橡膠塞和瓶蓋封閉小瓶，輕輕搖晃小瓶，并在使用前讓其靜置30分鐘。小瓶中的內容物應w全溶解，無可見顆粒。重懸的對照品在2-8°C下儲存1天是穩定的。如果需要，對照品可以分裝后在-20°C下儲存長達6個月。對照品不應反復凍融。

超靈敏胰島素ELISA結果計算

根據標準品構建標準曲線。零標準品應作為空白，其平均值應從每個孔中減去。建議使用軟件程序來計算標準曲線并確定樣本的濃度。ALPCO超敏胰島素ELISA是一種配體結合測定，其響應與分析物濃度呈S形關系。目前接受的此類曲線的參考模型使用4或5參數邏輯（pl）擬合，因為這些模型在更大范圍內優化了準確性和精確性。盡管三次樣條和其他模型是可接受的方法，但它們通常在范圍的低端和g端顯示出較低的內部檢測準確性和精確性。

在以下示例中，使用了5參數邏輯曲線擬合來da化低濃度樣本的準確性和精確性。然而，由于個別實驗室條件的影響，所有模型在可檢測范圍的gaodi端的準確性和精確性都是有限的。因此，在解釋分析物響應變得非線性的結果時，應始終謹慎。

典型標準曲線：

以下結果僅用于演示目的，不能代替測定獲得的數據。每次分析運行和平板測試都必須繪制標準曲線

預期值

ALPCO超敏胰島素ELISA是參照世界衛生組織胰島素第一國際參考制劑（IRP）66/304進行校準的。先前的研究確定正常的胰島素范圍為5 – 25 µIU/mL。建議每個實驗室為各自的患者群體建立自己的正常范圍。

單位換算

將人胰島素從國際單位（IU）轉換為克的換算關系為：1 IU人胰島素 = 6 nmol = 34.8 µg胰島素。