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CA19-9(Cancer antigen 19-9)ELISA Kit計算結果&標準曲線示例

時間:2024/9/5閱讀:126
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Calbiotech-CA19-9 ELISA試劑盒用于癌癥抗原的定量測定人血清或血漿中CA19-9濃度。

 

艾美捷Calbiotech-CA19-9Cancer antigen 19-9ELISA Kit

目錄編號  CA238T

產品類型 ELISA

數量  96次測試(12x8易碎條狀井)

標準范圍 25-600 U/mL

樣本體積 25 微升/

物種   人類

儲存和穩定性   將試劑盒存放在2 - 8°C的環境中。確保微孔板密封在裝有干燥劑的干燥袋中。試劑在試劑盒有效期內保持穩定。不要將試劑暴露在熱源、陽光或強光下。

 

CA19-9Cancer antigen 19-9ELISA Kit檢測原理:

CA19-9elisa試驗是一種改良的固相序貫夾心ELISA。將樣品和生物素化的單克隆抗體加入涂有鏈霉抗生物素蛋白的孔中。患者樣本中的CA19-9與生物素化捕獲抗體結合。生物素化的抗體同時與鏈霉抗生物素蛋白包被的平板結合。洗滌步驟后,加入抗CA19-9-HRP酶偶聯物,在捕獲的CA19-9周圍形成sa三明治。未結合的抗體被洗掉。加入TMB底物導致藍色的發展。CA19-9的濃度與顯色強度成正比。生成顏色強度與CA19-9濃度相關的標準曲線。

 

檢測程序:

將所有樣本和試劑盒試劑放置至室溫(20-25°C)并輕輕混合。

1. 在架子上固定所需數量的包被孔。

2. 向相應的孔中分配25 µlCA19-9標準品、樣本和對照品。

3. 向每個孔中分配100 µl的抗CA 19-9-生物素試劑(藍色溶液)。

4. 500-600 rpm下c底混合30秒鐘。w混合非常重要。

5. 在室溫下孵育60分鐘。

6. 清除所有孔中的液體。用350 µL1X洗滌緩沖液沖洗每個孔三次。每次沖洗后,將倒置的板子用力拍打在吸收性紙巾或紙巾上以去除殘留的液滴。

7. 向每個孔中分配100 µl的抗CA19-9-HRP酶結合物(紅色溶液)。

8. 在室溫下孵育60分鐘。

9. 按照步驟6描述的方法移除內容物并沖洗板子3次。

10. 向每個孔中分配100 µlTMB溶液。

11. 在室溫下孵育15分鐘,不要搖動。

12. 通過向每個孔中添加50 µl的終止溶液來停止反應。

13. 15分鐘內使用微孔板吸收光度讀數器(使用630nm的參考波長)讀取450nm處的吸光度。

 

計算和結果:

1. 計算每組參考標準、對照和樣本的平均吸光度值(A450)。

2. 通過在圖表紙上繪制每個參考標準的平均吸光度與其濃度(以U/ml為單位)的圖表,構建標準曲線,使用最佳擬合二次曲線在線性圖表紙上繪制,吸光度在垂直(y)軸上,濃度在水平(x)軸上。

3. 使用每個樣本的平均吸光度值,從標準曲線上確定相應的CA19-9濃度(以U/ml為單位)。

 

標準曲線示例:

典型的標準運行結果,以450nm處的光密度讀數在Y軸上顯示,對應于X軸上顯示的CA19-9濃度。此標準曲線僅供示例,不應用于計算未知數。每個用戶應在每次實驗中獲取自己的數據和標準曲線。

31.png

CA19-9Cancer antigen 19-9ELISA Kit文獻參考:

Glenn, J., Steinberg, W.M., Kurtzman, S.H., et at.  Evaluation of the utility of a radioimmunoassay for serum CA 19-9 level in patients before and after treatment of carcinoma of the pancreas.  J. Clin. Oncol. 1988; 6:462-8.

Hayakawa, T., Kondo, T., Shibata, T. et al.  Sensitive serum markers for detecting pancreatic cancer.  Cancer 1988; 61:1827-31.

Koprowski, H., Herly, M., Steplewski, Z., et al.  Specific antigen in serum of patients with colon carcinoma. Science 1981; 212:53-5

 

艾美捷科技是Calbiotech的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。


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