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永生化小鼠雪旺細胞表達神經膠質細胞標記物作用機制

時間:2024/5/15閱讀:163
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永生小鼠雪旺細胞表達神經膠質細胞標記物(S100GFAPp75NTR);參與施旺細胞發育和外周髓鞘形成的轉錄因子(Krox2Oct6PAX3SOX10);和神經營養因子(NGFBDNFGDNFCNTF)。

 

在生長因子如PDGF-BBaFGFbFGFTGF-β1存在的情況下,這些細胞表現出有絲分裂反應。IMS32細胞可用于研究參與外周神經再生的作用機制,并作為評估神經疾病發病機制的體外模型。用于檢測細胞標志物的免疫反應性。

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艾美捷abm永生化小鼠雪旺細胞基本參數:

貨號:T0295

名稱:永生化小鼠施萬細胞(IMS32

生物體:小鼠(M. musculus

組織:大腦

供體歷史:ICR 小鼠

生長特性:貼壁,紡錘形

細胞類型:永生化細胞

儲存條件:液氮的氣相,或低于-130°C

運輸條件:干冰運輸。

產品格式:冷凍

預期用途:本產品僅用于實驗室研究。不適用于任何動物或人類的治療用途,任何人類或動物的消費,或任何診斷用途。

生物安全等級:II

生長條件:

建議使用 PriCoat™ T25 燒瓶(G299)或應用細胞外基質(G422)以促進細胞對培養容器的粘附。PriGrow III (TM003) + 10% FBS + 1% 青霉素/鏈霉素溶液(G255),37.0°C5% CO?。

冷凍保存

使用冷凍保存培養基(TM024),或含有10% DMSO的wan全生長培養基進行冷凍保存。

細胞播種密度(每平方厘米細胞數):50,000 - 60,000

細胞群倍增時間(小時):45 - 55

永生化方法:自然永生化

表達

表達膠質細胞標記物(S100, GFAP, p75NTR)、參與施萬細胞發育和周圍髓鞘形成過程中的轉錄因子(Krox20, Oct6, PAX3, 和 SOX10),以及神經營養因子(NGF, BDNF, GDNF, 和 CNTF)。

材料引用

如果使用此材料導致科學出版物的發表,請按照以下方式引用材料:Applied Biological Materials Inc, 目錄編號 T0295

 

拆包和儲存指南:

1. 目視檢查包裝容器是否有泄漏或破損的跡象。

2. 立即將冷凍細胞從干冰包裝中轉移到-130°C以下的溫度中,最好在液氮氣相儲存中,直到準備使用。

為了確保最高的活性水平,在收到后盡快解凍小瓶并開始培養。如果需要繼續儲存,小瓶應僅儲存在-130°C以下或液氮氣相中。不要在-70°C儲存,因為這會導致活性喪失。

 

解凍程序:

1. 37°C水浴中快速解凍細胞,同時輕輕搖晃(最多2分鐘)。小瓶蓋應保持在水面以上,以最小化污染風險。

2. 70%乙醇噴灑并擦拭小瓶外部以消毒。從這一點開始,所有操作都應嚴格在生物安全柜內使用無菌條件進行。

3. 將細胞懸浮液轉移到含有5ml預熱的wan全生長培養基的15ml無菌圓錐管中。以125xg離心細胞5-7分鐘。

4. 在不干擾細胞沉淀物的情況下吸去上清液。將細胞沉淀物重新懸浮在推薦的預熱的wan全生長培養基中,并分裝到T25培養瓶中。

5. 在推薦的條件下培養細胞。

 

傳代程序:

下面給出的體積是針對T75瓶的;根據培養容器的大小按比例增加或減少體積。當培養容器80%充滿時傳代細胞。

1. 吸去培養基,并加入2-3ml預熱的0.25% Trypsin-EDTA到培養容器中。

2. 在顯微鏡下觀察細胞以確認脫落(通常在2-10分鐘內)。難以脫落的細胞可以放在37°C下,幾分鐘以促進脫落。

3. 通過向培養容器中加入相等體積的wan全生長培養基來中和Trypsin-EDTA

4. 將培養懸浮液轉移到無菌離心管中,并以125xg離心5分鐘。實際的離心持續時間和速度可能因細胞類型而異。

5. 吸去上清液,并用預熱的新鮮wan全生長培養基重新懸浮沉淀物。根據需要將適量的細胞懸浮液添加到新的培養容器中。

6. 在推薦的條件下培養細胞。

 

永生化小鼠雪旺細胞文獻參考:

Watabe, K., Fukuda, T., Tanaka, J., Honda, H., Toyohara, K., & Sakai, O. (1995). Spontaneously immortalized adult mouse Schwann cells secrete autocrine and paracrine growth-promoting activities. Journal of neuroscience research, 41(2), 279290.


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