細胞衰老是細胞停止分裂的現象。衰老可由內部(氧化應激、DNA損傷等)和外部(毒素、紫外線等)因素誘導。衰老是一種生長停滯的狀態,細胞在這種狀態下保持活力但停止分裂。衰老細胞表現出細胞大小增加,β-半乳糖苷酶、p53和P16活性的衰老相關表達,以及基因表達模式的改變。
AkrivisBio 的衰老檢測試劑盒旨在檢測β-Gal活性。β-Gal主要存在于衰老細胞中,但在正常表達β-Gal的細胞(如成熟巨噬細胞)中可能出現假陽性。
艾美捷AkrivisBio 細胞衰老染色試劑盒:
Catalog:COS-0102
Size: Includes reagents for staining 24-, 12-, 6- well plates
Sample Type:Cultured Adherent Cells
Species:All
Method of Detection:Light Microscopy
Assay Type:Qualitative
Application:To detect β-Gal activity in senescent cells under a light microscope.
Storage Conditions:4°C
Shipping Temperature:Gel Pack
Shelf Life:One year from the date of delivery
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目錄:COS-0102
尺寸:包括用于染色24、12、6孔板的試劑
樣品類型:培養的粘附細胞
物種:全部
檢測方法:光學顯微鏡
化驗類型:定性
應用:在光學顯微鏡下檢測衰老細胞中β-Gal的活性。
儲存條件:將試劑盒儲存在4°C溫度下。溶解X-gal后,將溶液儲存在-20°C,避光。
運輸溫度:凝膠包裝
保質期:一年
AkrivisBio 細胞衰老染色試劑盒組成:
固定液125 ml NM COS-0102-A
X-Gal(150 mg,凍干)1小瓶綠色COS-0102-B
含液125 ml WM COS-0102-C
含補充劑1.5 ml紅色COS-0102-D
-以下協議是為12孔板中的每個孔設計的。如果使用不同的板,則相應地調整體積(例如,對于6孔板,將體積加倍,對于24孔板,將體積減半)。
-制備PBS溶液(未提供)。每孔3毫升。
-X-gal溶液:X-gal具有吸濕性。在打開小瓶之前,讓其達到室溫30分鐘。稱取20 mg X-gal至琥珀色或鋁箔包裹的管,加入1ml N,N-二甲基甲酰胺,制備20X儲備溶液。未使用的X-gal溶液可以在–20°C(避光)下儲存1-2個月。始終使用裝有X-gal溶液的聚丙烯或玻璃容器。請勿使用聚苯乙烯。
-固定液、染色液和染色補充劑(100X)可在4°C下儲存。
-如果使用染色溶液或染色補充液發生沉淀,將溶液加熱至37°C,使沉淀物重新溶解。如果沉淀仍然存在,離心小瓶并使用上清液。
衰老檢測:
1.通過在孔邊緣抽吸從孔中取出培養基,并用1ml PBS洗滌細胞一次。
2.在室溫下用0.5ml固定液固定細胞10-15分鐘。細胞固定時準備染色。準備充分要染色的孔數的溶液。對于每口井,準備:染色溶液470µl染色補充劑5µlX-gal在25µl DMF中
3.用1ml PBS洗滌細胞兩次。
4.向每個孔中加入0.5 ml的染色溶液混合物。蓋住盤子。在37°C下培養過夜。
5.在顯微鏡下觀察細胞是否出現藍色(40–400 X)。
6.對于染色板的長期儲存,去除染色溶液并向細胞中添加70%甘油。在4°C下儲存。
艾美捷科技是AkrivisBio的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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