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武漢艾美捷科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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艾美捷人蛋白C(HCPC-0070)解決方案

時(shí)間:2023/7/3閱讀:89
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人蛋白C背景:

維生素K依賴性酶原C蛋白在肝臟中合成為單鏈多肽,隨后通過(guò)從前體分子。在血漿中觀察到痕量的單鏈形式。輕鏈負(fù)責(zé)蛋白C與磷脂囊泡的鈣依賴性結(jié)合,包含11個(gè)g-羧基谷氨酸(gla)殘基、1個(gè)b-羥基天冬氨酸殘基和2個(gè)表皮生長(zhǎng)因子(EGF)同源結(jié)構(gòu)域。絲氨酸催化三聯(lián)體位于重鏈中,已鑒定出其中的2種形式。形式“a"和“b"已顯示存在一個(gè)糖基化位點(diǎn)的差異,但未觀察到“a"和“b"之間的功能區(qū)別。人C蛋白重鏈Arg-12(牛中的 Arg-14)的單次切割將酶原轉(zhuǎn)化為絲氨酸蛋白酶,活化的C蛋白。這種切割由α凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面之間的復(fù)合物催化 蛋白凝血調(diào)節(jié)蛋白。與其他維生素K依賴性凝血因子不同,活化蛋白通過(guò)催化因子VaVIIIa的蛋白水解失活而起到抗凝血?jiǎng)┑淖饔谩?span style="font-family: Calibri;">APC還通過(guò)與纖溶酶原激活劑抑制劑形成復(fù)合物來(lái)促進(jìn)纖維蛋白溶解反應(yīng)。牛蛋白C是通過(guò)修改Walker程序從新鮮的檸檬酸鹽牛血漿制備的,如Haley等人所述使用常規(guī)層析技術(shù)從新鮮冷凍的檸檬酸鹽血漿中制備小鼠蛋白C。使用免疫親和層析和常規(guī)技術(shù)的組合從新鮮冷凍的檸檬酸鹽人血漿中制備人蛋白C。蛋白C50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C下。通過(guò)SDS-PAGE分析確定純度,并使用基于顯色底物的測(cè)定法測(cè)量活性。

 

艾美捷人蛋白C#HCPC-0070參數(shù):

本地化:等離子

血漿濃度:4-5µg/ml(人)(6

5-10µg/ml(牛)(2

作用方式:Zymogen;絲氨酸蛋白酶激活蛋白的前體

CAPC

分子量:62000(人)(7

5.8萬(wàn)(牛)(7

62000(鼠)-根據(jù)人類價(jià)值推斷

消光系數(shù):E1 cm,280 nm=14.5(人)(7

=13.7(牛)(7

=14.5(鼠)-根據(jù)人類價(jià)值推斷

等電點(diǎn):4.4-4.8(人)(8

4.2-4.5(牛)(8

結(jié)構(gòu):兩條鏈,Mr=410021000,二硫鍵連接,

NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比:23%(人體)(7

14%(牛)(7

翻譯后修飾:11個(gè)gla殘基(牛),

一種β-羥基天冬氨酸

 

人蛋白C文獻(xiàn)參考:

1 .  Esmon, C .T ., Progress in Thromb . and Hemostas ., 10, 25 (1984) .

2 .  Stenflo, J ., Semin . in Thromb . and Hemostas ., 10, 109 (1984) .

3 .  Walker, F .J ., et al., Biochim . Biophys . Acta, 571, 333 (1979) .

4 .  Haley, P .E ., et al., J . Biol . Chem ., 264, 16303 (1989) .

5 .  Jenny, R .J ., et al., Prep . Biochem ., 16, 227 (1986) .

6 .  Griffen, J .H ., et al.,Blood, 60, 261 (1982) .

7 .  Kisiel, W ., et al., Methods Enzymol ., 80, 320 (1981) .

8 .  Discipio, R .G ., et al., Biochemistry, 18, 899 (1979) .

9 .  Bajaj, S .P ., et al., Prep . Biochem ., 11, 397 (1981) .

10 . Kalafatis, M . et al., J . Biol . Chem ., 291, 1578 (2016)


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